文/圖  新希望六和 廣東片區(qū)配方師 劉滿仔

　　

　　中國水產(chǎn)頻道獨家報道，每年6-8月份的高溫季節(jié)，病害對養(yǎng)殖羅非魚的用戶來說，或是滅頂之災(zāi)，不同程度的死亡讓養(yǎng)殖戶焦頭爛額，或大量藥物加之，或放棄治療，隨之任之。今年羅非魚病害依然嚴峻，據(jù)不完全統(tǒng)計，粵西各地區(qū)發(fā)病率有的已高達7成，部分客戶死魚非常嚴重；8月份持續(xù)高溫天氣，空氣溫度38℃，表層水溫36℃的情況時常存在，發(fā)病率非常高，大部分用戶養(yǎng)殖的羅非魚均有不同程度死亡，7-8月份市場平均投喂率可能只有1%左右；筆者通過幾年的市場實踐，在粵西地區(qū)，對鏈球菌致羅非魚之死作一概述，以對防治、養(yǎng)殖有參考意義。

　　

　　1 鏈球菌的發(fā)現(xiàn)與分類

　　

　　鏈球菌（Streptococcus spp.）是一種分布于自然界的革蘭氏陽性菌，是人、畜、魚等重要病原菌。目前已有多個國家報道了魚類鏈球菌的爆發(fā)和流行。最早發(fā)現(xiàn)魚類感染鏈球菌的是日本學(xué)者于1957年在虹鱒的養(yǎng)殖中發(fā)現(xiàn)的，近年來受感染的魚類包括多種海水魚和淡水魚類，溫水性魚類受鏈球菌的危害尤其嚴重。而中國南方以羅非魚為主的淡水魚類受鏈球菌感染近年來呈現(xiàn)上升趨勢。

　　

　　根據(jù)國內(nèi)外各研究機構(gòu)從魚類分離的鏈球菌進行生理生化鑒定及分子生物學(xué)方法鑒定可分為海豚鏈球菌和無乳鏈球菌兩種。但根據(jù)國內(nèi)的一些研究所等對海南和廣東等取樣分離鑒定，確定為無乳鏈球菌，因此，對粵西羅非魚危害最大的可能為無乳鏈球菌。無乳鏈球菌被認為是唯一擁有B群特異性抗原的鏈球菌，因而也稱為GBS。

　　

　　2 最新臨床癥狀與組織病理學(xué)

　　

　　羅非魚暴發(fā)鏈球菌病后，其臨床癥狀和書本、報道的描述有出入，在發(fā)病初期體表幾乎無任何癥狀，解剖后可見肝臟輕微壞死，花肝嚴重或局部壞死或整體顏色偏黑，離群獨游，身體顏色偏深，腸道食物甚少、腸道萎縮、膽囊稍偏大，膽汁發(fā)黑；發(fā)病嚴重者，體表主要表現(xiàn)為眼球突出渾濁（部分病魚）、體表充血（部分）、身體消瘦、顏色偏深、肛門紅腫（擠壓有黃色液體流出）、離群獨游、浮頭、轉(zhuǎn)圈、時而狂游、時而靜止于水面或岸邊，解剖可見肝臟壞死嚴重或黑肝或顏色很淺、脾臟腫大顏色偏紅或發(fā)黑、腸道無物、腸道萎縮或套腸，腸腔有淡黃色液體（部分病魚）。有學(xué)者對患病羅非魚進行組織病理學(xué)研究，發(fā)現(xiàn)其主要的組織病理變化為鰓充血、鰓上皮增生、融合，結(jié)構(gòu)崩解；心肌纖維變性，肌間白細胞浸潤；肝臟顆粒變性和脂肪變性；腸道粘膜上皮變性、壞死、脫落、固有膜炎性白細胞浸潤；腎臟受損嚴重，白細胞浸潤，腎小管上皮細胞壞死，解體，小動脈血管壁玻璃樣變性；眼睛脈絡(luò)膜和眶骨膜組織炎性壞死，晶狀體纖維斷裂和脫離。

　　

　　下圖為經(jīng)檢測初步確定為鏈球菌感染的一些臨床癥狀

　　

　　3  鏈球菌感染羅非魚通路

　　

　　羅非魚感染鏈球菌的方式是多樣性的，如苗種自生攜帶、池塘底泥殘留、水質(zhì)污染等，其傳播的方式以水平傳播為主，非常迅速，當(dāng)在適當(dāng)?shù)臏囟认卤�發(fā)時，3-5天內(nèi)可波及全塘，尤以魚的糞便、死魚的尸體、流通的水體等途徑傳播迅速。EVANS等認為，鏈球菌是通過魚體間的直接接觸或養(yǎng)殖環(huán)境受鏈球菌污染所致；AGNEW W、邱軍強等認為血溶性路線是鏈球菌感染傳播的主要途徑。但從近年來的研究發(fā)現(xiàn)，鏈球菌感染魚體后，通過體內(nèi)循環(huán)直接進入細胞的細胞質(zhì)內(nèi)，破壞細胞質(zhì)的線粒體后，供能系統(tǒng)受到破壞，體內(nèi)DNA復(fù)制受阻，進而破壞細胞。

　　

　　羅非魚感染鏈球菌的過程，從病理生物學(xué)和檢測的先后順序角度結(jié)合實際考察來看有以下過程（可能推測），如下圖所示。首先，魚體感染上鏈球菌后，在適當(dāng)?shù)臏囟认麓罅糠敝�，鏈球菌首先攻擊魚體的器官是肝臟，相關(guān)研究也表明首先是從肝臟分離出致病菌，肝臟被感染后，肝功能代謝發(fā)生障礙，由于肝臟是魚類儲藏血液和解毒的主要器官，當(dāng)肝臟發(fā)生障礙后，肝臟顆粒變性和脂肪變性，魚體免疫機能下降；其次，脾臟發(fā)生變化，但并不是全部病魚都很明顯，明顯者如下圖所示，顏色和形態(tài)均出現(xiàn)異常，顏色變紅且淺，體型變厚變大且末端圓盾；然后，腎臟也會發(fā)生細微變化，嚴重者形成內(nèi)出血；再者，病原菌感染頭部神經(jīng)，這時候魚體已到感染后期，游動緩慢，離群獨游，或靜止于水面或岸邊，或在水面打圈游動；再而，病原菌在頭部大量繁殖，擠壓頭部神經(jīng)，壓迫眼球擠壓推出，形成突眼，這時候已到病入膏肓?xí)r期，無可挽救，不日將死亡。其中肝臟受損后，因膽汁為肝臟分泌，膽囊也會有影響，常形成膽囊腫大，膽汁發(fā)黑現(xiàn)象。

　　

　　

　　

　　4 鏈球菌發(fā)生之表觀分析

　　

　　粵西每年的羅非魚發(fā)病時間為5-9月份為多，集中在6-8月份，相關(guān)研究表明，鏈球菌最佳的發(fā)病水溫為32℃，而在晴天的晚上8點對水溫的測定，1-1.5米的水溫高達35℃。

　　

　　鏈球菌是一種條件性致病菌特征非常明顯的一種細菌，縱觀全年的氣溫變化及養(yǎng)殖情況，這種病害集中發(fā)生在夏天，尤其持續(xù)高溫的天氣，水溫在32℃以上時極易爆發(fā)，而鏈球菌對飼料、品種、池塘條件、密度等的依賴性并不是十分強烈。也就是說，當(dāng)池塘有鏈球菌存在，溫度達到要求，這種病害必定發(fā)生，而病害的程度才與其它因素有關(guān)。

　　

　　                   

　　

　　以上為某養(yǎng)殖戶發(fā)病非常嚴重的池塘溫度，死亡量每天數(shù)千尾，可見當(dāng)天下午3-4點空氣溫度為36.4℃，1.5米處溫度為33.5℃，而溶氧卻高達9.11 mg/L，氨氮，亞硝酸鹽幾乎沒有。

　　

　　另一方面，對廉江區(qū)域的調(diào)查發(fā)現(xiàn)一個很有趣的現(xiàn)象，見下圖《廉江區(qū)池塘水深與發(fā)病率關(guān)系》所示，共調(diào)查的81養(yǎng)戶中，水體深度2-3米的發(fā)病率76.19%，4-5米深度的發(fā)病率45.24%，而6米以上深度的池塘發(fā)病率僅為27.78%，據(jù)有限的樣本數(shù)據(jù)可總結(jié)為，發(fā)病率與池塘水體深度呈負相關(guān)，水體深度與水溫密切相關(guān)，水越深，溫度越低，可推測為，溫度是直接影響病害發(fā)生的主要因素。

　　

　　4.2 苗種因素表現(xiàn)突出

　　

　　不完全調(diào)查表明，羅非魚鏈球菌病害與品種有很大關(guān)系。新挖的池塘并沒有感染源，卻發(fā)生嚴重病害；堅持每月消毒調(diào)水，水質(zhì)條件非常好，溶氧6mg/L以上的池塘也發(fā)生嚴重死亡。當(dāng)以上認為是鏈球菌感染事實后，可以懷疑是魚類的品種差異所導(dǎo)致的。

　　

　　苗種因素可歸結(jié)為兩方面：一是苗種本身帶有致病菌，只是在適當(dāng)?shù)臏囟认卤患せ罘敝常��?dāng)達到一定程度下感染所致；二是苗種本身體質(zhì)、抗病力差異較大情況下，因池塘存在或外界流入致病菌后，在適當(dāng)?shù)臏囟葪l件下爆發(fā)，導(dǎo)致體質(zhì)較弱的魚體先感染，后通過水平傳染致其它魚體大量感染。

　　

　　而據(jù)粵西局部地區(qū)2012的不完全調(diào)查表明，奧尼品系與吉富品系在發(fā)病率和死亡量上還是存在很大的差異。見下表和下圖。

　　

　　表1 粵西吉富品系客戶和奧尼品系客戶發(fā)病率比較　　

　　

　　以上數(shù)據(jù)僅代表局部區(qū)域，不能概述全部。對總樣本量795戶的養(yǎng)殖戶調(diào)查表明，奧尼品系的抗病力明顯高于吉富品系。這種說法或太過籠統(tǒng)，并不是說吉富的抗病力就一定很差，因為選擇群體所用的吉富品系來源渠道各不相同，品種難以區(qū)分，加之粵西市場羅非魚苗魚龍混雜，分不清楚具體吉富品系。但總體可以說明，因吉富品系的苗種本身問題（親本退化，苗種來源復(fù)雜等）所導(dǎo)致的抗病力弱的情況非常嚴重，所以2012年至今，一些意識較強的養(yǎng)殖戶基本都會選擇價格更高的奧尼品種。

　　

　　4.3 養(yǎng)殖密度

　　

　　近年來國內(nèi)外有些多學(xué)者、專家認為鏈球菌的發(fā)生與養(yǎng)殖密度有很大關(guān)系。NARAID等認為鏈球菌的發(fā)生與養(yǎng)殖密度過大、水質(zhì)理化因子變化等引起魚體應(yīng)激反應(yīng)有關(guān)；HERNANDEZ等發(fā)現(xiàn)哥倫比亞的紅羅非魚感染無乳鏈球菌與高密度有關(guān)。但此這種說法太過籠統(tǒng)，到底多少才算密度過大，在什么樣的養(yǎng)殖模式下才算高密度，故此不能量化。本調(diào)查在粵西當(dāng)前的養(yǎng)殖模式及養(yǎng)殖密度下，認為養(yǎng)殖密度與發(fā)病率并無直接關(guān)系，如下圖所示局部區(qū)域81戶樣本調(diào)查數(shù)據(jù)，放養(yǎng)600-1000尾/畝、1100-1500尾/畝、1600-2000尾/畝、2100-3000尾/畝，其發(fā)病率幾乎差別不大，在實際考察中，一些養(yǎng)殖戶4000-5000尾/畝的池塘也相安無事，而800尾/畝的池塘有的客戶卻發(fā)病嚴重，故根據(jù)局部區(qū)域調(diào)查表明，當(dāng)前平均2000尾/畝的放養(yǎng)密度并不是制約疾病發(fā)生的因素。

　　

　　4.4 水質(zhì)與飼料

　　

　　養(yǎng)魚先養(yǎng)水是有道理的，對于魚體來說，水體就是它生活的環(huán)境，良好的水質(zhì)條件有利于提高魚體的免疫機能，減少疾病的發(fā)生并提高對飼料的消化率，降低飼料系數(shù)，而水質(zhì)惡化如氨氮、亞硝酸鹽超標即加大了魚體肝膽負荷和機體抗應(yīng)激壓力，進而刺激魚體更容易感染病原菌。不能說粵西的立體混養(yǎng)池塘水質(zhì)過差就很容易感染鏈球菌，而海南文昌的精養(yǎng)羅非魚地區(qū)，基本無豬糞鴨糞污染，其水質(zhì)條件良好，發(fā)病率有時候也高達9成。故水質(zhì)并不是發(fā)生鏈球菌的必要條件，而是在一定程度上起到協(xié)同作用，所以調(diào)水內(nèi)服的功效就是為了降低這種協(xié)同作用，通過水質(zhì)調(diào)理和內(nèi)服調(diào)控，提高魚體免疫機能，抑制病原菌的繁殖，還是有一定積極的效果。

　　

　　飼料可能也會導(dǎo)致魚體感染鏈球菌，王瓊秋等發(fā)現(xiàn)鏈球菌病的漁場所用的飼料中存在與患病魚一致的鏈球菌。但現(xiàn)階段無直接數(shù)據(jù)證明飼料是誘發(fā)病害的原因，故此因素還有待進一步考察。當(dāng)然，優(yōu)質(zhì)的飼料對提高消化及免疫力是有影響，劣質(zhì)飼料只會加快肝膽病變的速度。有人甚至認為飼料中能量的高低，蛋白的高低會導(dǎo)致發(fā)生鏈球菌病，這是欠缺科學(xué)依據(jù)的。

　　

　　5 鏈球菌檢測

　　

　　嚴格來說，要確診是否鏈球菌感染必須是通過取樣、培養(yǎng)、分離，再通過分子生物學(xué)鑒定才能確定是否鏈球菌感染，而在臨床診斷上，可通過革蘭氏染色和鏡檢快速初步判斷是否鏈球菌感染，筆者通過數(shù)十例診斷，基本都能鑒定出來。

 　　

　　正常肝細胞視圖                         感染后肝細胞視圖

　　

　　但在高溫期并不是所有死魚就說明是鏈球菌引起的，其它細菌性疾病也可導(dǎo)致大量死魚，如下圖所示為在茂名市場發(fā)現(xiàn)的一起非鏈球菌感染的羅非魚死亡案例。

　　

　　

　　

　　羅非魚發(fā)病后，如何治療成為廣大養(yǎng)殖戶非常頭疼的問題，養(yǎng)殖戶停止投喂并不是為了控制病情，因投料與不投料對魚的死亡量沒有關(guān)系，故不投料純屬是為了降低飼料損失；事實上，任何事物的發(fā)生必然是量的積累過程，細心觀察會發(fā)現(xiàn)，鏈球菌感染也是量的積累結(jié)果。2014年5月份在吳川博鋪市場某養(yǎng)殖戶處，當(dāng)時發(fā)現(xiàn)其魚塘零星數(shù)條死亡，隨即解剖活病魚查看，以臨床經(jīng)驗診斷后，告知養(yǎng)殖戶這個魚塘在高溫月份可能有大量死亡的風(fēng)險，當(dāng)前必須做預(yù)防措施，但養(yǎng)殖戶不以為然，至6月份后開始有部分魚死亡，再次告知之并提供防治方案，養(yǎng)戶依然不以為然，至7月份后得知魚塘每天數(shù)千斤死亡量，損失慘重，養(yǎng)戶方想起當(dāng)初的忠告。是故，病害并不可怕，可怕的是無知；病害是有預(yù)兆的，也是可以預(yù)防的。

　　

　　治療，如果已經(jīng)發(fā)生了大量的魚體死亡，即必須用抗生素治療，局部區(qū)域數(shù)量統(tǒng)計，抗生素的有效率僅為33.33%（見下表），很多養(yǎng)殖戶反饋治療沒有效果。事實上并不是沒有效果，而是藥的本身問題和用藥劑量問題，可發(fā)現(xiàn)市場抗生素獸藥非常繁多，其中不乏冒牌貨，假貨，而最終又是養(yǎng)殖戶來買單。在治療方面，目前市場上用的最多的是磺胺類藥物，但單用磺胺嘧啶，或只能發(fā)揮藥物的60%功效，要配合增效劑使用才更加有效。又如氟苯尼考，市場上的品種非常多，有效含量各不相同；其次，由于藥物本身質(zhì)量問題，加之養(yǎng)殖戶在用藥劑量上不好把控，最終因魚體攝食劑量不夠而沒有達到理想效果。

　　

　　表2 抗生素使用效果統(tǒng)計表

　　經(jīng)過藥敏試驗是可以篩選出抑制鏈球菌有效的抗生素，陳昌福等從海南省某水產(chǎn)養(yǎng)殖場患病的奧尼羅非魚中，分離到1個編號LFY-08-23的菌株，經(jīng)過分離菌株進行16SRNA基因的克隆及序列分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)LFY-08-23菌株與無乳鏈球菌的生理生化特性相似，高達99.8%，用分離出來的LFY-08-23菌株對異育銀鯽和斑點叉尾鮰人工感染試驗，在某種濃度下，LFY-08-23菌株對頭孢氨噻肟、丙氟哌酸、利福平、氧氟沙星、先鋒必、頭孢唑啉、頭孢拉啶、頭孢呋肟、潔霉素、紅霉素、青霉素、阿莫西林、左氟沙星等14 種藥物高度敏感;而對呋喃妥因、新生霉素、強力霉素、四環(huán)素、萬古霉素、麥迪霉素、氟苯尼考等7種藥物敏感;對卡那霉素、鏈霉素、慶大霉素、磺胺異惡唑、復(fù)方新諾明等5 種藥物不敏感。

　　

　　表 3  LFY -08 -23 菌株對藥物敏感性的試驗結(jié)果

　　 

                                    （注：摘自陳昌福，譚晶晶等，2010）

　　

　　6.1 中西藥結(jié)合是較為有效的治療方法

　　

　　至于具體的方法措施一定是根據(jù)病害的程度，有針對性處理，以下列舉一例典型的治療方法，可供參考。

　　

　　茂名客戶某月14號魚種塘開始發(fā)病，前兩天10-50尾死亡量，三天后600尾，最高死亡量超過1000尾，癥狀如下圖，經(jīng)鏡檢分析診斷，初步確定為鏈球菌感染。通過消毒，抗生素搭配中草藥類藥品內(nèi)服，效果非常顯著。其中所用的抗生素為某品牌氟苯尼考（50%含量），中草藥主要成分為大黃、黃柏、黃芩等，消毒劑為某品牌二氧化氯，用量各根據(jù)說明書上的治療劑量。經(jīng)過消毒，內(nèi)服4天后，病情得到控制，死亡量慢慢減少，從1000多尾到幾尾，這種急發(fā)型病情的效果比較顯著，如果是長時間死亡了，此法效果不理想，可能是致病菌繁殖的量達到很高的程度。在治療期間要注意兩個問題：1 、內(nèi)服投喂量不宜過大，1-1.5%即可。2、消毒與內(nèi)服期間要開增氧機。

　　

　　實際中，應(yīng)根據(jù)病害的輕重緩急來處理，不同程度處理的方法不一樣，所用藥物也可不相同，如在消毒劑和中草藥的使用上，可選用的品種很多，但不管何種方法，安全是最重要的。

　　

　　表4 客戶池塘羅非魚死亡量情況表

　　 

　　

　　7 抗生素對魚體影響

　　

　　很多研究表明，抗生素對魚體的生長及健康均有影響，有養(yǎng)殖戶反映投喂后，生長速度變慢，內(nèi)臟變差。魚體攝食抗生素后，經(jīng)過循環(huán)進入肝臟，作為解毒器官的肝臟會出現(xiàn)比較明顯的變化，是否藥物殘留，殘留多少與投喂時間和攝食劑量有關(guān)，但目前在市場上的一些零星發(fā)現(xiàn)，投喂抗生素后對魚體的肝臟是有影響的（暫不上圖）。

　　

　　8對養(yǎng)殖規(guī)劃管理的影響

　　

　　據(jù)以上分析總結(jié)，望對廣大養(yǎng)殖戶有借鑒之處，如何做好養(yǎng)殖規(guī)劃是養(yǎng)殖成功最為重要的環(huán)節(jié)。

　　

　　8.1 做好全年養(yǎng)殖規(guī)劃節(jié)奏

　　

　　以避開高溫月份，在放苗的時間與標粗應(yīng)考慮到7-8月份的規(guī)格，如果是1-2兩發(fā)病，可停料減少損失，如果6兩以上發(fā)病，可根據(jù)情況出魚處理，最難處理的是3-6兩，損失是最嚴重的。

　　

　　8.2 適當(dāng)降溫

　　

　　降低溫度的措施很多，如挖深魚塘，設(shè)置遮陽物，增氧攪動水體，高溫期不斷加注深井水等，可能很多養(yǎng)殖戶因條件有限做不到，但開增氧機是必要的，甚至可以全天輪流開，如在大塘可使用水車式增氧機、葉輪式增氧機、涌浪機等組合，輪流開啟，既能增氧也能降溫，而一些養(yǎng)殖理念較強的養(yǎng)戶，還采用了底部增氧措施。

　　

　　8.3 選擇優(yōu)質(zhì)苗種

　　

　　如果其他條件不能改變，建議選擇優(yōu)質(zhì)的苗種是一種比較安穩(wěn)的措施，純種的奧尼是抗病力比較強的品種，優(yōu)質(zhì)的吉富也是不錯的選擇，總之，苗種帶有致病菌及苗種自身抗病力是整個養(yǎng)殖過程比較關(guān)鍵的環(huán)節(jié)。如2012-2013年吳川養(yǎng)殖區(qū)，某品牌的奧尼品系發(fā)病率僅為33%，死亡率很低，而來源比較復(fù)雜的吉富品系，不管發(fā)病率還是死亡率，都非常高。

　　

　　8.4 投喂與內(nèi)服

　　

　　晴天最低溫度是早上，最高溫度是下午和晚上10點前，所以早上投喂是最安全的，要想魚體早上食欲好，晚上12點后可開增氧機至早上。高溫期間，適當(dāng)減少投喂量，一般控制在2%以內(nèi)。飼料中的脂肪來源不同，在高溫期間發(fā)生脂肪氧化的程度不一樣，如毛魚油（海水與淡水）在短時間內(nèi)可氧化變質(zhì)，攝食這些飼料，加大魚體肝膽負荷，降低免疫水平。

　　

　　內(nèi)服保肝護膽類藥物對預(yù)防鏈球菌效果甚微，需長期服用才有效果，可內(nèi)服多糖類免疫增強劑（如黃芪多糖）及VC等配合使用，但需要7-10天持續(xù)投喂，或更長時間，而一般養(yǎng)殖戶很難做到。

　　

　　8.5 適時消毒

　　

　　有效和適當(dāng)?shù)南�毒能有效解決大量死亡問題，尤其是在高溫起來前的強力徹底消毒（如氯制劑），和高溫期間的溫和性消毒能有效防止鏈球菌的大量繁殖，這些預(yù)防措施非常關(guān)鍵，把致病菌致病的風(fēng)險降到最低，才能有效防止病害的發(fā)生。很多用戶通常使用生石灰，但在使用劑量和時間間隔上，筆者認為還有很大空間去挖掘。

　　

　　8.6 水質(zhì)管理

　　

　　調(diào)水的成本很高，業(yè)務(wù)員和技術(shù)員的水平可能也有限，很多養(yǎng)殖戶水也調(diào)了，一個月還調(diào)了3次，錢也花了，但還是發(fā)病，主要還是沒有科學(xué)的調(diào)水理念，調(diào)水要有針對性，要清楚這次調(diào)水的目的是什么，如果是為了降低氨氮和亞硝酸鹽，要思考對鏈球菌是否起到抑制作用。事實上，氨氮和亞硝酸的降低并不是一兩次調(diào)水就能解決問題，尤其是高密度羅非魚蝦混養(yǎng)塘，調(diào)水是一個長期的過程，要堅持。很多研究表明，補充一定量的微生態(tài)制劑，對抑制有害細菌的產(chǎn)生是有效的，如使用EM菌，但要及時補充劑量。

　　

　　9 小結(jié)

　　

　　以多年的臨床經(jīng)驗認為，鏈球菌既可以預(yù)防，也是可以治療控制的，但需要養(yǎng)殖戶提升養(yǎng)殖管理理念，把控各個關(guān)鍵關(guān)節(jié)。以上僅從局部區(qū)域情況去探討和分析問題，不能代表全部事實，同時亦有大量的數(shù)據(jù)調(diào)查和圖片沒有附上。以上僅供參考，或有不詳及不盡之述。