中國水產(chǎn)頻道獨(dú)家報(bào)道，美國亞利桑那大學(xué)對(duì)蝦病害頂尖研究專家DonaldVLightner教授在稱EMS病原是一種罕見的副溶血弧菌，中國國內(nèi)部分對(duì)蝦專家對(duì)其感染機(jī)理的說法仍持觀望態(tài)度，一切有待Lightner教授公布其實(shí)驗(yàn)報(bào)告來詳細(xì)解釋。
　　
　　文/圖《水產(chǎn)前沿》撰稿人 蔡章潔
　　

　　5月1日美國亞利桑那大學(xué)對(duì)蝦病害頂尖研究專家DonaldVLightner教授在GAA上稱已發(fā)現(xiàn)EMS（早期死亡綜合癥）的病原是一種罕見的副溶血弧菌，因噬菌體感染該副溶血弧菌并引起其釋放強(qiáng)的毒素。該細(xì)菌經(jīng)口傳播并定植在對(duì)蝦消化道，產(chǎn)生毒素引起組織損壞，并造成對(duì)蝦肝功能紊亂及消化系統(tǒng)障礙。
　　
　　筆者就此采訪了多名對(duì)蝦學(xué)術(shù)專家、技術(shù)服務(wù)人員，更多的人傾向于認(rèn)同Lightner的觀點(diǎn)，與弧菌相關(guān)并且具有中毒表現(xiàn)，但是具體的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)支持尚有待Lightner本人解釋。而黃倢則認(rèn)為EMS病因是YHV新型病毒，弧菌是繼發(fā)性感染。
　　
　　EMS（EarlyMortalitySyndrome）一般譯作早期死亡綜合癥，多發(fā)于蝦苗放養(yǎng)7-30天，患病對(duì)蝦體色呈白濁并微紅，多數(shù)情況下肝胰臟異常腫大，質(zhì)地松軟，顏色呈淡白或淡黃色；部分患病對(duì)蝦的肝胰臟明顯萎縮，質(zhì)地變硬。發(fā)病期間，患病對(duì)蝦通常在池塘水面緩慢游動(dòng)或趴伏于池塘邊坡上，失去食欲，胃、腸充塞度極差，嚴(yán)重者胃腸呈紅色。該病病情發(fā)展十分迅速，死亡率和排塘率極高，從發(fā)現(xiàn)少量病蝦到排塘，時(shí)間最短的僅2-3天。
　　
　　Lightner教授表示，EMS與AHPNS（AcuteHepatopancreasNecrosisSyndrome，急性肝胰腺壞死綜合癥）是描述同一種疾病。而肝胰腺壞死癥（俗稱“偷死病”）是多在養(yǎng)殖到60天以后發(fā)生的，多發(fā)生于高密度養(yǎng)殖環(huán)境，相對(duì)比較高溫的地區(qū)。
　　

　　

　　何建國：EMS發(fā)病癥狀更似中毒
　　
　　對(duì)蝦發(fā)生EMS病害之后死亡速度之快，超出了病毒和細(xì)菌性疾病的研究速度，就其發(fā)病特點(diǎn)來看更像是中毒癥狀。
　　
　　“就目前的研究來看，并不能否定他的觀點(diǎn)。而就他所發(fā)表的結(jié)果看，與我們2010年傾向于認(rèn)為中毒的觀點(diǎn)也一致，但是他所認(rèn)為的中毒方式我們也沒有做過研究，不能否定他的觀點(diǎn)�！焙谓▏�表示，對(duì)蝦發(fā)生EMS病害之后死亡速度之快，超出了病毒和細(xì)菌性疾病的研究速度，整體來說比較傾向兩方面的原因，一個(gè)是副溶血性弧菌致病，第二個(gè)更傾向于中毒，引起中毒的因素可能與種苗質(zhì)量的抗逆性下降有關(guān)，2010年對(duì)蝦EMS發(fā)病有兩個(gè)特征，一是，與土苗相比，進(jìn)口一代苗發(fā)病幾率大；二是，藍(lán)藻成為優(yōu)勢種。
　　
　　何建國表示，Lightner教授的報(bào)告出來之后，會(huì)做驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)，如果他的觀點(diǎn)不成立，也會(huì)原先的研究方向，沒有影響。如果他的觀點(diǎn)成立，有兩個(gè)比較淺顯的問題需要考慮，一是，這種罕見的弧菌來源是哪里？是什么途徑造成了中國以及東南亞地區(qū)的病害？二是，這種毒素是不是只對(duì)小蝦有作用，如果產(chǎn)生的毒素的毒性如此之強(qiáng)，并且經(jīng)口傳播，到養(yǎng)殖中后期是否會(huì)大量死亡？
　　
　　但是從對(duì)蝦產(chǎn)業(yè)發(fā)展來考慮，更多的應(yīng)該尋找檢測以及防治辦法。何建國建議農(nóng)業(yè)部加強(qiáng)進(jìn)口親蝦的檢測，如果在親蝦中發(fā)現(xiàn)WSSV、弧菌和YHV，則堅(jiān)決不予進(jìn)口。養(yǎng)殖上消毒要徹底，如果真的如Lightner所說，噬菌體侵染弧菌而引起產(chǎn)生的毒素，那么早期消毒的時(shí)候?qū)⒊氐紫�毒干凈，噬菌體也可以被殺滅。兩個(gè)措施防控之下，就算有弧菌也沒有噬菌體，有噬菌體也沒有弧菌，就構(gòu)不成病害。
　　
　　目前采用了許多殺滅弧菌的方式，但是還是不斷在發(fā)生弧菌病害，對(duì)此，何建國表示，這主要是因?yàn)榫哂锌顾幮缘募?xì)菌不斷增多，“在偷死病的研究中，我們用6種抗性基因分別檢測分離鑒定菌株攜帶情況，總檢出率高達(dá)80%，其中氟喹諾酮類抗生素檢出率達(dá)17.0%，而養(yǎng)殖中所用的環(huán)丙沙星就屬于此類，因此抗生素在預(yù)防上作用不大�！�
　　
　　那么消毒為什么沒有作用呢，因?yàn)槲覀儸F(xiàn)在消毒劑多采取水體潑灑的方式，而蝦是在底部生活的，因此，一定要有底部消毒（筆者注，期間何建國多次強(qiáng)調(diào)一定是針對(duì)池底的消毒），用顆粒狀二溴海因拌上干砂、干泥土投放水中，10-13天消毒一次，二溴海因是對(duì)蝦類藻類刺激小，并且是微溶于水，會(huì)慢慢釋放。
　　
　　“2011年、2012年對(duì)蝦的主要病害依舊是偷死病和WSSV。消毒加生物防控基本可以應(yīng)對(duì)偷死病和病毒病�！焙谓▏�說，現(xiàn)在生物防控效果不好，主要有兩個(gè)原因，一是一旦同時(shí)發(fā)生偷死病和病毒病，魚類不會(huì)選擇性攝食，發(fā)生偷死病和白斑綜合癥的一律攝食，因此徹底消毒控制好偷死病也是生物防控的基礎(chǔ)；二是，養(yǎng)殖戶在真正實(shí)踐的時(shí)候并沒有按照我們的標(biāo)準(zhǔn)放養(yǎng)。
　　
　　何建國透露，近期的研究中，在對(duì)蝦體內(nèi)發(fā)現(xiàn)另外一種細(xì)菌，這種細(xì)菌是用于殺滅昆蟲的，昆蟲和對(duì)蝦都是節(jié)肢動(dòng)物。但是關(guān)于此細(xì)菌的研究，目前還在進(jìn)行中。
　　

　　

　　黃倢：新型YHV或是EMS元兇
　　
　　這一基因型與現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)的YHV的6個(gè)基因型均不相同，而在OIE水生動(dòng)物診斷手冊中的YHV檢測方法對(duì)該毒株的檢測靈敏度很低。
　　
　　“在我們的研究中，從多地患EMS/AHPNS的對(duì)蝦中都檢出了此前從未檢出過的黃頭病毒（YHV）一個(gè)株型，這一基因型與現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)的YHV的6個(gè)基因型均不相同�！敝袊�水產(chǎn)科學(xué)院黃海水產(chǎn)研究所研究員黃倢認(rèn)為這個(gè)新基因型的YHV有可能是這場病的元兇。
　　
　　據(jù)黃倢介紹，這一基因型與現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)的YHV的6個(gè)基因型均不相同，而在OIE水生動(dòng)物診斷手冊中的YHV檢測方法對(duì)該毒株的檢測靈敏度很低，甚至檢測不到陽性。2006年澳大利亞學(xué)者從泰國的凡納濱對(duì)蝦中分離的一株高毒力的YHV的一個(gè)基因片段的缺失在此基因型中也存在，這說明這個(gè)基因型對(duì)凡納濱對(duì)蝦可能具有較高的毒力。在感染實(shí)驗(yàn)中，患病蝦勻漿液經(jīng)微孔濾膜過濾的濾液能導(dǎo)致健康對(duì)蝦在數(shù)天內(nèi)死亡，表明存在病毒的感染。
　　
　　目前實(shí)驗(yàn)團(tuán)隊(duì)正在對(duì)不同地域的YHV毒株進(jìn)行基因組測序，初步的測序結(jié)果表明，我國檢出的該毒株存在明顯的變異，這可能與凡納濱對(duì)蝦不斷地引種有關(guān)。
　　
　　該病毒去年已向農(nóng)業(yè)部報(bào)告，農(nóng)業(yè)部已于去年年底向OIE進(jìn)行了通報(bào)。目前黃海所的實(shí)驗(yàn)團(tuán)隊(duì)正在研發(fā)高靈敏度的檢測試劑盒，研發(fā)工作已接近實(shí)用化，有望生產(chǎn)上只需簡單的水浴鍋或恒溫器在1-2小時(shí)內(nèi)就能高靈敏度地對(duì)該病原進(jìn)行檢測。但其靈敏度和對(duì)不同地理株的適用性等相關(guān)工作還有待于進(jìn)一步驗(yàn)證和完善。
　　
　　黃倢的實(shí)驗(yàn)團(tuán)隊(duì)也曾在2010年從北海發(fā)生的EMS/AHPNS的病蝦中就分離到了一株毒力高、抗藥性強(qiáng)的副溶血弧菌，但他們懷疑該病原可能是繼發(fā)感染。針對(duì)Lightner教授的觀點(diǎn)，黃倢表示，“Lightner在原來的EMS/AHPNS病理學(xué)分析中認(rèn)為細(xì)菌是二次感染，現(xiàn)在他們的研究認(rèn)為噬菌體感染的副溶血弧菌是該病的病原，這個(gè)結(jié)論需要更多的分子流行病學(xué)證據(jù)的支持。
　　
　　總體來說副溶血弧菌的存在可能比較廣，是否這種情況都能導(dǎo)致EMS/AHPNS這還需要時(shí)間來檢驗(yàn)�！�
　　
　　“當(dāng)然，還有可能是這場病是由多種不同的原因引起的不同的疾病，我們最近在病理上注意到無菌的YHV感染的肝胰腺的病理特征和有菌感染的肝胰腺的病理特征存在差別，而這兩種特征都包括在Lightner所描述的AHPNS的病理特征之中�！秉S倢表示，在病害發(fā)生的初期，各種病因可能都會(huì)引起人們的關(guān)注，而隨著研究的深入，流行病學(xué)信息全了之后，事情就會(huì)慢慢變得清晰。
　　

　　

　　賴秋明：綠色弧菌毒力強(qiáng)
　　
　　綠色弧菌在養(yǎng)殖水體中均可經(jīng)口感染對(duì)蝦的消化器官，并可在對(duì)蝦的消化器官中定植并生長繁殖，并且綠色弧菌比黃色弧菌具有更強(qiáng)的毒力。
　　
　　“Lightner教授的研究團(tuán)隊(duì)已確認(rèn)EMS的病原是一株特異的副溶血弧菌，我很認(rèn)同這個(gè)觀點(diǎn)。2012年11月在寧波舉辦的蝦蟹養(yǎng)殖研討會(huì)上，我已談到這個(gè)問題，根據(jù)我們這兩年的實(shí)驗(yàn)研究和生產(chǎn)驗(yàn)證，我還是堅(jiān)持原來的觀點(diǎn)，認(rèn)為一株變異的副溶血弧菌是引發(fā)對(duì)蝦EMS的主要原因�！辟嚽锩饕琅f持原來的觀點(diǎn)，認(rèn)為所分離出的綠色弧菌是主要原因。
　　
　　賴秋明實(shí)驗(yàn)團(tuán)隊(duì)從患病對(duì)蝦的肝胰臟分離出一株弧菌優(yōu)勢菌株，在TCBS培養(yǎng)基上其菌斑的顏色呈綠色，在實(shí)驗(yàn)室條件下，以該弧菌菌株不同梯度密度感染南美白對(duì)蝦。只要水中綠色弧菌的接種密度為2.5×104cfu·mL-1時(shí)，10天內(nèi)的累計(jì)死亡率達(dá)到98%。死亡對(duì)蝦的外表癥狀與“早期死亡綜合癥”基本一致，并從死亡幼蝦的肝胰臟檢測到大量的綠色弧菌。綠色弧菌在養(yǎng)殖水體中均可經(jīng)口感染對(duì)蝦的消化器官，有很強(qiáng)的感染能力，并可在對(duì)蝦的消化器官中定植并生長繁殖。筆者認(rèn)為綠色弧菌比黃色弧菌具有更強(qiáng)的毒力。并且，人工感染試驗(yàn)是在實(shí)驗(yàn)室的條件下進(jìn)行，由于受光照的限制，養(yǎng)殖水體中沒有藻類，說明在沒有藻類存在情況下，對(duì)蝦同樣會(huì)出現(xiàn)“早期死亡綜合癥”的癥狀。（詳見本刊85頁《南美白對(duì)蝦EMS發(fā)病特點(diǎn)及防控》）
　　
　　往期相關(guān)報(bào)道
　　
　　《泰國對(duì)蝦首席DrChalor談蝦病》（《水產(chǎn)前沿》5月刊）
　　
　　《聚焦對(duì)蝦病害，或非病毒致病》
　　
　�。ā端�產(chǎn)前沿》2012年10月刊）
　　
　　《GAA：EMS病原已被證實(shí)》
　　
　　中國水產(chǎn)頻道每日頭條
　　
　　何建國建議的生物防控技術(shù)放養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)如下：
　　
　　草魚生物防控技術(shù)：適用于對(duì)蝦養(yǎng)殖密度5-8萬尾/畝，在鹽度8‰以上的水域，放養(yǎng)1kg左右的草魚，30-50尾/畝，對(duì)蝦養(yǎng)殖到10-20天就放草魚。
　　
　　革胡子鯰生物防控技術(shù)：鹽度6‰以下水域，放養(yǎng)250-500g革胡子鯰，40-50尾/畝。
　　
　　美國紅魚生物防控技術(shù)：對(duì)鹽度沒有限制，適用于蝦苗放養(yǎng)密度5-8萬/畝，放養(yǎng)60g左右的美國紅魚，50尾/畝，在放蝦苗20天之后放紅魚。
　　
　　石斑魚生物防控技術(shù)：針對(duì)日本囊對(duì)蝦尤為有效，對(duì)別的蝦不如日本囊對(duì)蝦明顯，石斑魚最好是200g以上，放50-60條/畝。
　　
　　軍曹魚生物防控技術(shù)：15尾/畝，不能放多，放養(yǎng)體長為15cm左右的軍曹魚。
　　
　　同時(shí)，防止偷死病、細(xì)菌病以及其他附著生物，最好搭配養(yǎng)殖吃碎屑和藻類的生物，高鹽度地區(qū)可放養(yǎng)籃子魚苗，200-300尾/畝。低鹽度地區(qū)放羅氏沼蝦，30-40%的羅氏沼蝦搭配60-70%的凡納賓對(duì)蝦，并且在放養(yǎng)羅氏沼蝦40天后再放凡納賓對(duì)蝦。