魚食性與腸道菌群關(guān)系的初步研究

cjlittlepig

摘自《水產(chǎn)科學》

摘　要：對淡水養(yǎng)殖池中的烏鱧、鰱魚、鳊魚、鯽魚不同食性魚的后腸菌群進行了定性、定量分析，結(jié)果表明：四種魚的后腸壁和后腸內(nèi)容物都是厭氧菌總數(shù)遠大于好氧菌總數(shù)；后腸內(nèi)容物菌數(shù)遠大于后腸壁菌數(shù)；不同的魚，后腸壁的好氧菌總數(shù)差別很大，而厭氧菌總數(shù)差別不大；后腸內(nèi)容物中的厭氧菌總數(shù)和好氧菌總數(shù)為：烏鱧> 鯽魚> 鰱魚> 鳊魚；而后腸壁細菌含量與食物沒有明顯的關(guān)系；后腸內(nèi)容物和后腸壁中的雙歧桿菌數(shù)為：烏鱧> 鯽魚> 鰱魚> 鳊魚。表明后腸內(nèi)容物中的細菌總數(shù)、后腸內(nèi)容物和后腸壁中的雙歧桿菌數(shù)都與食性相關(guān)。大腸桿菌、腸球菌和乳酸菌在后腸的分布沒有規(guī)律，說明它們與食物相關(guān)性不強。

關(guān)鍵詞：食性；魚；腸道；菌群；好氧菌；厭氧菌；雙歧桿菌

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    對魚類腸道菌群組成的研究，國外曾有一些報道，但未見比較系統(tǒng)的研究。早在1953 年，Margolis發(fā)現(xiàn)禁食對魚腸道菌有影響[1]。1976年Yoshimizu等對魚腸道沙門氏菌進行了研究[2]。1985年Haruo等對淡水養(yǎng)殖池中羅非魚、金魚、鯉魚等的腸道菌作了研究，指出了魚腸道存在好氧或兼性厭氧菌、專性厭氧菌[3]。1987年Haruo報道淡水養(yǎng)殖池中弧菌—氣單胞菌的穩(wěn)定，而其它細菌受外界環(huán)境因素的影響較大[4]。但Hansen認為魚類腸道不一定存在穩(wěn)定的細菌群落[5]。目前，比較統(tǒng)一的認識是魚類腸道存在細菌。國內(nèi)對魚類腸道菌群的研究起步相對較晚，主要集中在條件致病菌與腸道菌群關(guān)系的研究[6，、外界因素對腸道菌群影響的研究[8～和腸道菌群對宿主的消化和生長的影響研究[11，等，這些研究說明腸道菌群對魚類的抗病、生長和發(fā)育有重要的意義。但幾乎所有的研究都以腸道內(nèi)容物為研究對象，對腸壁菌群的研究極少，對腸壁與腸道內(nèi)容物關(guān)系的研究則沒有。并且，大多數(shù)研究以好氧菌為研究對象，對厭氧菌的研究較少。趙慶新等發(fā)現(xiàn)不同亞科的魚間菌群有較大的差異[13]，但這些差異由哪些因素引起，魚食性影響腸道消化殘渣，是否因此而影響居于腸道的菌群，值得探討。本實驗以4 種不同食性的魚的后腸壁和后腸內(nèi)容物中的2 種好氧菌、2 種厭氧菌以及好氧菌總數(shù)、厭氧菌總數(shù)為研究對象，試圖揭示腸道壁與腸道內(nèi)容物的菌群(包括好氧菌和厭氧菌) 之間的關(guān)系、魚腸道菌群與食性的關(guān)系，以期為水產(chǎn)魚類腸道菌群研究提供一些基礎數(shù)據(jù)。

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1 材料與方法

1.1材料選擇
    以4 種不同食性的魚為實驗材料：食浮游植物食的鰱魚、草食性的鳊魚、肉食性的烏鱧以及雜食性的鯽魚。樣本采集于紹興文理學院生物系淡水養(yǎng)殖場。體重013～015 kg ，體內(nèi)外均無傷病，腸道充盈度較好。每種魚3 條，重復3 次。

1.2菌液的制備
    魚體隨機采集后，用75 %酒精進行魚體消毒。無菌條件下解剖，取出腸道。75 %酒精棉球擦拭腸管外壁，無菌水反復沖洗，用無菌棉線結(jié)扎中腸與后腸、后腸與肛門交界處。剖開后腸，取內(nèi)含物015 g。再用無菌水將后腸壁沖洗3 遍，剪碎，稱取011 g 放入裝有玻璃珠的三角瓶內(nèi)。再分別稀釋得到10- 2 ，10- 3 ，10- 4 ，10- 5 ，10- 6 ，10- 7 ，10- 8稀釋液。

1.3細菌的分離培養(yǎng)
    選用國內(nèi)外學者常用的幾種培養(yǎng)基進行好氧菌總數(shù)和厭氧菌總數(shù)以及各種腸道細菌的分離培養(yǎng)[7，8，10，14](表1) 。

1.4細菌的計數(shù)及鑒定
    經(jīng)FWA ，EG培養(yǎng)后選菌落數(shù)在30～300 個之間的平板進行好氧菌總數(shù)和厭氧菌總數(shù)計數(shù)，并換算成每克樣品所含菌數(shù)量(cfu/ g) 。
        4 種細菌的鑒定及定量按康白等介紹的方法進行[7，8，14，。先鑒定4 種選擇性培養(yǎng)基的選擇性：對每個選擇性培養(yǎng)基平板選6個典型菌落進行菌落特征、細菌形態(tài)及生理生化特性鑒定，結(jié)果證明4種選擇性培養(yǎng)基具有高度選擇性，即各選擇性培養(yǎng)基上的典型菌落就是所需菌落。再對每種培養(yǎng)基上的典型菌進行平板菌落計數(shù)，并換算成每克樣品所含菌數(shù)量(cfu/ g) 。

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2 結(jié)果與討論
    菌群測定的定量結(jié)果見表2 。
    由表2可知：各種魚的后腸壁和后腸內(nèi)容物都是厭氧菌總數(shù)遠大于好氧菌總數(shù)，厭氧菌是腸道菌群的主要組成成分；好氧菌總數(shù)、厭氧菌總數(shù)、腸球菌、大腸桿菌、乳酸菌、雙歧桿菌都是后腸內(nèi)容物的遠大于后腸壁，說明細菌的生長繁殖場所主要在腸腔。
    不同種魚后腸壁的好氧菌總數(shù)差別很大(如鰱魚后腸壁好氧菌總數(shù)是鯽魚后腸壁好氧菌總數(shù)的58倍) ，而厭氧菌總數(shù)差別不大(最大數(shù)鳊魚與最小數(shù)鰱魚之間的比值僅為214 倍) 。人腸道菌群在腸道有3個生物層，深層為厭氧菌并和腸壁共生形成生物膜，中層為一些厭氧菌，表層為好氧菌游動于腸腔[16]。魚類可能也有厭氧菌與腸壁共生形成生物膜，因此含量穩(wěn)定，而好氧菌可游離于腸腔中間，因此在腸壁的隨機波動性很大。
        4 種魚的后腸內(nèi)容物中的厭氧菌總數(shù)和好氧菌總數(shù)為肉食性的烏鱧> 雜食性的鯽魚> 以浮游植物為食的鰱魚> 草食性的鳊魚，說明后腸內(nèi)容物細菌數(shù)量和食物的種類有關(guān)，也間接的說明后腸內(nèi)容物的細菌是靠吸收后腸內(nèi)容物中的養(yǎng)分生存。4 種不同食性魚后腸壁細菌含量與食物種類沒有明顯的關(guān)系。
        4 種不同食性魚腸道的后腸內(nèi)容物和后腸壁中的雙歧桿菌都是：肉食性的烏鱧> 雜食性的鯽魚>以浮游植物為食的鰱魚> 草食性的鳊魚，這4 種魚的壽命長短也是烏鱧> 鯽魚> 鰱魚> 鳊魚，許多研究表明雙歧桿菌與生物的壽命成正相關(guān)[17，，這里也體現(xiàn)了這種相關(guān)性，同時說明雙歧桿菌的數(shù)量與食物種類有關(guān)系，肉類食物比植物類食物更適宜雙歧桿菌生長，更有利于長壽。大腸桿菌、腸球菌和乳酸菌在后腸的分布沒有規(guī)律，說明它們與食物的相關(guān)性不強。

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華農(nóng)小漁民

這篇文章作者是誰呢？
華中農(nóng)業(yè)大學陳孝煊做魚類腸道微生物做的比較多。

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華農(nóng)小漁民 發(fā)表于 2012-8-7 21:14
這篇文章作者是誰呢？
華中農(nóng)業(yè)大學陳孝煊做魚類腸道微生物做的比較多。

作者清單：尹軍霞, 張建龍, 沈文英, 石巧紅, 顧海鳳。
你是陳孝煊的學生吧？對他這么了解？你是做哪方面研究的呀？我們交流交流，啊啊。