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標(biāo)題: 【在線交流】水生動物粘孢子蟲及其疾病防控建議（完整版） [打印本頁]
作者: 一片云 時間: 2016-7-27 11:57
標(biāo)題: 【在線交流】水生動物粘孢子蟲及其疾病防控建議（完整版）
本帖最后由 一片云 于 2016-8-11 17:38 編輯
獨(dú)家重磅推薦
水生動物粘孢子蟲及其疾病防控建議
—— 章晉勇博士
時間：7月29日19:30
地點(diǎn)：中國水產(chǎn)頻道公開課 中國水產(chǎn)頻道 【在線交流】欄目同步直播
2016年是厄爾尼諾現(xiàn)象比較頻繁的一年，5月、6月雨水較同期偏多，目前在鹽城的大豐、射陽等地異育銀鯽的喉孢子蟲病呈現(xiàn)集中爆發(fā)趨勢，與以往喉孢子蟲病的發(fā)病癥狀不同，此次發(fā)生喉孢子蟲病的池塘的瀕死魚體色偏向正常，眼球突出的較少，體表顏色較正常，不少養(yǎng)殖戶根據(jù)以往對喉孢子蟲的診斷經(jīng)驗(yàn)極易成誤診，造成了較大的損失。為此中國水產(chǎn)頻道特邀擅長水生微寄生蟲及其防控的中國科學(xué)院水生生物研究所章晉勇博士做客中國水產(chǎn)頻道在線探討水生動物粘孢子蟲及其疾病防控建議。如果您也遇到過類似問題，也有一些體會心得，誠邀您一起分享參與討論 ！
嘉賓簡介：
章晉勇，2006年畢業(yè)于中國科學(xué)院大學(xué)，獲博士學(xué)位， 現(xiàn)就職于中國科學(xué)院水生生物研究所。負(fù)責(zé)水生微寄生蟲及其防控方向。
課程錄音
http://www.tudou.com/v/mT9kk5Hdb7I/&rpid=536160155&resourceId=536160155_04_05_99/v.swf
課程內(nèi)容
1、 孢子蟲的簡介、分類、生活史
1、孢子蟲的簡介
2、孢子蟲的分類
3、孢子蟲的寄主和生活史
2、孢子蟲的感染和傳播機(jī)制
1、感染機(jī)制
2、傳播機(jī)制
3、孢子蟲的防控策略（會詳細(xì)講解哦�。�
1、科學(xué)防控的基礎(chǔ)
2、防控策略
3、防控策略總結(jié)
4、當(dāng)前幾種常見的粘孢子蟲
1、丑陋圓形碘泡蟲Myxobolus turpisrotundus
2、汪氏單極蟲 Thelohanellus wangi n.sp. 鰓孢子蟲病
3、武漢單極蟲 Thelohanellus wuhanensis—膚孢子蟲病
4、洪湖碘泡蟲 Myxobolus honghuensis 喉孢子蟲病或腦孢子蟲病
5、龜甲單極蟲 Thelohanellus testudineus n.sp.
6、吳李碘泡蟲Myxobolus wulii 腹/肝孢子蟲病
7、瓶囊碘泡蟲 Myxobolus ampullicapsulatus n. sp. 鰓孢子蟲病
8、多涅茨尾孢蟲 Henneguya doneci
9、吉陶單極蟲 Thelohanellus kitauei
10、石斑魚球孢蟲 Sphaerospora epinephelus
11、塔形碘泡蟲 Myxobolus pyramidis
12、貝殼碘泡蟲 Myxobolus musseliusae
13、口腔碘泡蟲 Myxobolus oralis n. sp.
5、適合我國當(dāng)前養(yǎng)殖實(shí)際的魚類粘孢子蟲病防控策略
作者: 一片云 時間: 2016-7-27 17:26
本帖最后由 一片云 于 2016-8-9 11:44 編輯
各位大家晚上好，首先感謝水產(chǎn)前沿和水產(chǎn)頻道給的這樣一次機(jī)會讓我跟大家做一個交流。二來我要做這樣一件事情也有一個很簡單的理由： 我回國五六年的時間里在一線塘口也跑了不少，期間發(fā)現(xiàn)很多養(yǎng)殖包括養(yǎng)殖戶、賣藥的、賣料的、甚至一些技術(shù)員和一些行政部門對粘孢子蟲包括孢子蟲都不是十分了解，所以我覺得很有必要跟大家普及一下這方面的知識，可能對今后防控水生動物的粘孢子蟲病有一定的幫助。
一、孢子蟲基礎(chǔ)生物學(xué)簡介
首先，簡單的介紹孢子蟲基礎(chǔ)生物學(xué)的東西。孢子蟲是一個很大的類群。
由于之前的研究手段和某些認(rèn)知水平的不足把很多關(guān)系不是很親密的類群放在一塊了，之前把孢子蟲放在了原生動物門孢子蟲綱，其中包括今天講的粘孢子蟲、最近比較流行的引起對蝦生長緩慢的甚至水癟子有關(guān)的微孢子蟲、雙殼類（例如生蠔）的單孢子蟲、魚類的球蟲等。
我主要研究水里面的需要借助顯微鏡來看的寄生蟲，我把它統(tǒng)稱為微寄生蟲。而吸蟲、絳蟲、線蟲或者甲殼類等肉眼可見的我把它統(tǒng)稱為大寄生蟲。
作者: 一片云 時間: 2016-7-27 17:27
本帖最后由 一片云 于 2016-8-9 11:47 編輯
二、粘孢子蟲的研究歷史
粘孢子蟲的研究歷史很長，1826年就有人接觸第一例粘孢子蟲。在我國，解放戰(zhàn)爭前蘇聯(lián)、西歐、日本有一些人來中國采過一些樣，真正的發(fā)展在解放以后，由陳啟鎏先生和馬成倫先生領(lǐng)導(dǎo)的魚病學(xué)團(tuán)隊開始進(jìn)行粘孢子蟲的研究。
由于以前做病毒和細(xì)菌的條件有限，所以之前魚類病害的研究基本上是研究寄生類的病害。
圖中右邊簡單的圖是粘孢蟲的一個主要的類群叫碘泡蟲屬。原來研究的時候用碘液染色，就發(fā)現(xiàn)孢子里面有嗜碘泡，所以把整個有嗜碘泡的東西叫做碘泡蟲，在《中國粘孢子志》中區(qū)別粘體蟲屬就是看是否有碘泡，但是后來隨著技術(shù)的發(fā)展，人類認(rèn)識水平的提高，發(fā)現(xiàn)嗜碘泡不是一個有效的分類特征。這是一個基礎(chǔ)的東西，不管是養(yǎng)殖戶、賣料的、賣藥的所有的從業(yè)者，如果想認(rèn)識這個東西，首先就要認(rèn)識這類病原。
右邊這張圖可以幫你在顯微鏡下看到粘孢子蟲，其大概的大小應(yīng)該是7-20um。
對粘孢子蟲的認(rèn)識其實(shí)也是一個逐漸深入的過程，其實(shí)粘孢子是一個非常大的類群。
現(xiàn)在已經(jīng)報道的粘孢子蟲大概有2600多種，將近60個屬，這個數(shù)字還在持續(xù)的增長。因?yàn)楹芏嗾虫咦酉x本身就是自然界存在的，很多種也不會引起病害，特別是一些寄生在膽囊等的所謂腔寄生粘孢子蟲大多不會引起病害。
全世界因?yàn)檎虫咦酉x引起的病害非常非常厲害，不僅會導(dǎo)致經(jīng)濟(jì)損失，而且在包括美國很多野生生境也會導(dǎo)致生態(tài)災(zāi)害。
我們看右邊的這張圖，形形色色的孢子蟲長得千奇百怪，他們都屬于粘體動物門。
右邊左上角是軟孢子蟲綱，迄今為止在我們國內(nèi)沒有發(fā)現(xiàn)，其余都是粘孢子蟲綱。有60多屬，而且這2600多種數(shù)值還在不斷的增加，如果研究投入足夠的話，我估計這個數(shù)字會突破一萬，因?yàn)槊織l魚身上大概都能檢測到數(shù)種，例如鯽魚就檢出70多種粘孢子蟲，盡管很多種不會引起病害的。
作者: 一片云 時間: 2016-7-27 17:28
本帖最后由 一片云 于 2016-8-9 11:48 編輯
三、寄主
我們一直在說病害的發(fā)生是基于三環(huán)理論的：病原、宿主、環(huán)境。剛才講了病原——粘孢子蟲。由于粘孢子蟲是寄生類，它必須要有宿主才能存活，除了在水體底泥里的粘孢子，其能在體外存活很長時間的，但是大部分時間還是依賴于宿主進(jìn)行繁殖和發(fā)育。
粘孢子蟲最重要的宿主是魚，剛才說的2600多種95%以上是在魚體里面發(fā)現(xiàn)的，粘孢子蟲還有可能寄生在兩棲類（左下角的圖）、水禽、爬行類如龜鱉、鳥類等，現(xiàn)在發(fā)現(xiàn)大部分是寄生在水生動物的。
粘孢子蟲的中間宿主是水生無脊椎動物，主要是水蚯蚓，其實(shí)也不能說是水蚯蚓是它的中間宿主，因?yàn)榘船F(xiàn)在的研究發(fā)現(xiàn)，它的有性生殖是發(fā)生在水蚯蚓的，其實(shí)魚等其它的脊椎動物都應(yīng)該算是它的中間宿主，水蚯蚓反而是它的終末宿主。
右下角這張圖是值得關(guān)注的，長期以來人們認(rèn)為粘孢子蟲對人類有無害，但現(xiàn)在的研究發(fā)現(xiàn)有它可以寄生在哺乳動物內(nèi)，雖然在人和高等哺乳動物體內(nèi)沒有，但是可以感染小老鼠，在歐洲等很多山區(qū)都已經(jīng)有發(fā)現(xiàn)，可能的傳播途徑是地蚓感染了，然后小老鼠吃了感染的地蚓從而發(fā)生感染；另外大概3年前在日本，寄生在肌肉里面的粘孢子蟲引起了日本一次比較嚴(yán)重的食物中毒事件，因?yàn)檎虫咦酉x是一種肌肉寄生，肉眼看不到，但其能分泌一種蛋白酶，可造成嚴(yán)重的過敏反應(yīng)。
作者: 一片云 時間: 2016-7-27 17:29
本帖最后由 一片云 于 2016-8-9 11:50 編輯
四、粘孢子蟲的生活史
我們一直倡導(dǎo)生態(tài)養(yǎng)殖，生態(tài)防控的病害基于什么原理呢？
如果從病原角度來講的話，我個人認(rèn)為應(yīng)該考慮病原的生活史。
大家都知道，粘孢子蟲一旦發(fā)育到成熟的孢子（肉眼能夠看到的包囊），比如皮膚上的囊腫，到這個時候已經(jīng)是晚期了，粘孢子蟲的孢子有很堅硬的幾丁質(zhì)殼包裹著，幾丁質(zhì)殼是藥物極度耐受的，如果你的藥物能夠殺死它，魚也就完了，所以如果有人在宣稱有藥物能殺死肉眼能夠看到的孢囊的話，這肯定是忽悠你的。
早在1984年美國人和歐洲人就已經(jīng)報道了引起鮭鱒魚嚴(yán)重病害的腦旋轉(zhuǎn)病病原的生活史。
我們要防控粘孢子蟲病首先要找到病原在一個生活史周期中哪一個階段是我們可以有效干預(yù)的。在成熟孢子階段藥物是不能控制的，因?yàn)橐呀?jīng)是發(fā)病晚期了。
引起鮭鱒魚旋轉(zhuǎn)病的病原是寄生在脊椎里面的，引起神經(jīng)損傷，所以導(dǎo)致魚體的旋轉(zhuǎn)，也因此叫脊椎碘孢蟲，后來跟底棲動物的研究者合作，發(fā)現(xiàn)成熟孢子沉到底泥以后，被水蚯蚓吃了以后，在水蚯蚓里面長成左下角三角形的放射孢子蟲，放射孢子蟲在水體里面遇到易感宿主魚后，侵染魚體并在魚體內(nèi)發(fā)育成熟，成為成熟粘孢子。
自1984年人們發(fā)現(xiàn)了第一例的放射孢子蟲后，20幾年的研究發(fā)現(xiàn)大部分的水生動物無脊椎動物都可能是它的中間宿主，主要包括水蚯蚓等寡毛類生物。
由于改革開放前文獻(xiàn)交流的障礙，很多老先生都是做原生動物起家等原因，2000年以前我國研究人員直認(rèn)為粘孢子蟲是原生動物，成蟲可以直接感染魚的，直到2001年發(fā)現(xiàn)了我國的第一例放射孢子蟲。
放射孢子蟲如錨狀的突起東西，我個人認(rèn)為是為了增加它在水體里面的浮力，因?yàn)檫@個蟲子在水體里面的生命力很差，能存活的時間很短，而且沒有游動能力，所以只能是增加浮力，以盡可能增加其和易感的魚接觸的機(jī)會，從而完成它的世代更替，這是寄生蟲聰明的地方。
作者: 一片云 時間: 2016-7-27 17:29
本帖最后由 一片云 于 2016-8-9 11:51 編輯
如何知道水里面有沒有放射孢子蟲呢？
左邊一個很簡單的網(wǎng)，大概是10um孔徑的網(wǎng)，是我拖朋友從德國買的，國內(nèi)好像還沒有，國內(nèi)這么大目數(shù)的網(wǎng)俄孔徑一般都是鋼絲的，沒有這種柔韌性。如果有條件的話，取池塘的中下層或者中層10L的水，過一下這個網(wǎng)，然后逐漸的瀝水，把水只剩下幾毫升的時候，放在顯微鏡下面看，如果池塘里面放射孢子蟲的豐度很高的話，顯微鏡下面是能夠看到剛才看到的不同類型的放射孢子蟲。
如果對底棲動物有了解的話，比如說水蚯蚓，你可以用右邊的這種細(xì)胞培養(yǎng)板，用采泥器把泥巴挖出來，然后用篩子把泥巴篩掉，把蚯蚓挑出來放在培養(yǎng)細(xì)胞的細(xì)胞培養(yǎng)板里面，在室溫下可以放幾天，如果時間長或者溫度高的話水蚯蚓很容易降解掉，觀察一兩天，用吸管吸一點(diǎn)水，用顯微鏡去觀察，如果出現(xiàn)放射孢子蟲就能觀察到。
這是2009年以后國內(nèi)發(fā)現(xiàn)的放射孢子蟲，大家可以看一下。
作者: 一片云 時間: 2016-7-27 17:30
本帖最后由 一片云 于 2016-8-9 11:55 編輯
剛才我們說粘孢子蟲大概有2600多種，其對應(yīng)的放射孢子蟲大概只發(fā)現(xiàn)了60多種，還有大量的放射孢子蟲沒有發(fā)現(xiàn)，工作量很大，主要的原因是粘孢子蟲在水蚯蚓的感染率非常的低，有時候你找1000條水蚯蚓，可能只有1條感染的。
根據(jù)我們這多年的調(diào)查，我們建立了這樣一個感染平臺，見右邊左上角。就是從魚身上剝離包囊，用它們來喂這個缸子里面是水蚯蚓，水蚯蚓是從蚓繭開始養(yǎng)得，因?yàn)檎虫咦酉x不會垂直傳播，即不會上一代傳給下一代，所以蚓繭培育的水蚯蚓是沒有感染的，用孢子蟲去感染這種水蚯蚓，完成它的世代更替，這個在實(shí)驗(yàn)室是已經(jīng)可以做得到的。網(wǎng)上有些大神說粘胞蟲根本不需要水蚯蚓，那么現(xiàn)在可以明確的告訴你，我們在實(shí)驗(yàn)室已經(jīng)可以完成這樣一個循環(huán)了，而且國外在1984年就已經(jīng)完成了這樣一個循環(huán)，這個已經(jīng)是科學(xué)定論。
作者: 一片云 時間: 2016-7-27 17:30
本帖最后由 一片云 于 2016-8-9 11:58 編輯
武漢單極蟲也就是我們所謂的鯽魚的膚孢子蟲病病源。汪氏單極蟲是一種鰓孢子蟲病的病源。吳李碘泡蟲也就是腹/肝孢子蟲病的病源，會引起腹部腫大的，整個肝臟都有寄生。吉陶單極蟲引起鯉魚出現(xiàn)皮膚囊腫，但大多數(shù)寄生在腸道里面，引起巨腸癥，在、以色列、韓國等主要是危害觀賞魚的。
既然知道了粘孢子蟲需要水蚯蚓發(fā)育的過程，釋放的放射孢子蟲才是感染魚類的感染源，所以我們看粘孢子蟲的生活史片子能夠清楚的看到，從魚身上脫落的或者魚死亡以后分解成熟的粘孢子，掉水里面，然后進(jìn)入到底泥里面，底棲動物不管是水蚯蚓還是其他的底棲無脊椎動物就會吃掉它，然后在右上角這個圖，打箭頭的地方，可以看到在無脊椎動物、水蚯蚓的腔的上皮細(xì)胞里面寄生的，進(jìn)而破壞上皮細(xì)胞，最后到達(dá)水蚯蚓的腔里面，右下角是吉姆薩染色的，可以看已經(jīng)脫落的成熟的粘孢子蟲，像錨一樣的，還有一些在魚的腔里面，發(fā)育過程當(dāng)中，整塊掉下來，放射孢子蟲到水里面以后通過魚的皮膚或者鰓的粘液細(xì)胞進(jìn)入以后釋放感染性胚質(zhì)，在魚身上會移行，最后到達(dá)不同的寄生部位。這也是為什么從皮膚或者鰓里面進(jìn)去，有些蟲子在喉部，有些蟲子在腎部，有些蟲子在脊椎里面，在魚里面有一個移行過程，直到移動到最終的部位，比如喉孢子蟲，寄生在喉部，從F到G里面都是它的移行過程的不同發(fā)育階段。
當(dāng)然如果有人看了文獻(xiàn)以后，就有一個疑問了，既然你說粘孢子蟲都需要水蚯蚓，但是西班牙科學(xué)家發(fā)現(xiàn)腸粘蟲，比如河豚、海鱸里面它就能魚-魚傳播呢？我解釋一下，這個確實(shí)是有，這個西班牙科學(xué)家我也很熟。這個蟲子有兩個原因，一個是這個蟲子中間宿主還沒有找到，這張圖是他畫的，在D的地方打了個？，他確定有，但是沒有找到，第二個原因，他為什么魚魚傳播，因?yàn)榧纳谀c道里面，所以未成熟的會隨著糞便排到水體里面，然后可能接觸到未感染魚的腸道末端，從而繼續(xù)在新的宿主魚里面發(fā)育。所以粘孢子主要的方式還是需要水體無脊椎動物水蚯蚓的，當(dāng)然也有魚-魚傳播的，但在國內(nèi)還沒有發(fā)現(xiàn)。
再來看一看從水蚯蚓里面長大的放射性的孢子蟲是怎么感染。這個也是德國人在98年做的一個工作，他們在電鏡下發(fā)現(xiàn)放射孢子蟲扒在皮膚上，然后受到化學(xué)感應(yīng)、魚的擺動造成水的機(jī)械的作用會會把殼瓣打開，然后釋放感染性的胚質(zhì)。下面是一德國哥們做了一個模型圖，打圓圈的就是感染性的胚質(zhì)，這些是在魚體里面增殖最原始的細(xì)胞，怎么進(jìn)入到魚體里面，最后怎么完成釋放的過程。
作者: 一片云 時間: 2016-7-27 17:30
本帖最后由 一片云 于 2016-8-9 12:00 編輯
回到基礎(chǔ)知識，我們剛才說了防控還是要看它哪個地方是薄弱環(huán)節(jié)，從病原的角度來講，從放射孢子蟲侵染魚的鰓和皮膚粘液細(xì)胞以后，我們所謂前孢子發(fā)展的過程到成孢子之前的中間這個階段，這些都是他的薄弱環(huán)節(jié)，大部分經(jīng)歷多核階段的寄生蟲都有可能用藥物如鹽酸胍，地克珠利來防控，阻斷它的發(fā)育，也可以說是殺死，不讓它前進(jìn)。
水蚯蚓的體內(nèi)發(fā)育就不講了，因?yàn)槲覀�人覺得不光是在我們國內(nèi)的當(dāng)下養(yǎng)殖的現(xiàn)狀下還是在國外的池塘養(yǎng)殖都不可能完全控制池塘底泥的水蚯蚓，當(dāng)然工廠化養(yǎng)殖還是可以做。因?yàn)楣S化最主要有兩點(diǎn)。一個是SPF苗的引入，第二就是不需要任何其他的生物除了細(xì)菌的存在。還是可以控制的，但是在我國尤其蘇北的池塘養(yǎng)殖下水蚯蚓是不可能控制的，只能盡量降低它的豐度。
作者: 一片云 時間: 2016-7-27 17:31
本帖最后由 一片云 于 2016-8-9 12:03 編輯
國內(nèi)粘孢子蟲有哪些類型，引起哪些病害?
這張片子里面給了三種類型，最左邊在鯽魚身上，是丑陋圓形碘泡蟲蟲，雖然看著嚇人，但是感染率比較低，特別是在蘇北基本上很難看到，這是我們在湖北發(fā)現(xiàn)的，我們把感染這蟲的魚放在實(shí)驗(yàn)室養(yǎng)，養(yǎng)到冬季的時候，它身上的孢囊基本可以脫落光，魚體也恢復(fù)正常，所以盡管感染很嚴(yán)重，但其實(shí)并沒有很嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失，當(dāng)然對垂釣塘的影響就比較明顯了。因?yàn)獒灥竭@種魚的人可能就再也不會到你那去釣了。
最右的是就是鰓里面的，我看到網(wǎng)上有些賣藥的人，所謂的專家，告訴你在鰓上看到一兩個包囊就用殺孢子的藥，這個我是極度反對的，而且我也不建議養(yǎng)殖戶這么做，因?yàn)槿藗兪紫纫幸粋�概念，這個概念要有深入水產(chǎn)養(yǎng)殖從業(yè)者的心中，寄生蟲也是生態(tài)里面的一部分，人不可能把它趕盡殺絕，如果你真把寄生蟲趕盡殺絕了，那你等于把自己也趕盡殺絕了。中間這個是引起經(jīng)濟(jì)損失的，就是感染比較嚴(yán)重的喉孢子，喉癌或者腦癌，鰓孢子是因?yàn)榘颜麄�鰓弓都撐起來了，你可以看到，其實(shí)這張片子還不是很嚴(yán)重，它外部的喉嚨的正常組織還是很明顯的，里面豆腐渣的基本上是孢囊，它已經(jīng)取代了很大一部分的咽部組織，其它未感染的咽部還是健康的，如果這個時候出現(xiàn)了細(xì)菌性感染，整個外部未感染的組織也會有淤血樣的癥狀，肯定是現(xiàn)了繼發(fā)性的細(xì)菌感染。大部分的粘孢子蟲是沒有害的，不需要用藥，而且到這個階段你用藥也沒有用，寄生蟲既然是兩宿主的寄生蟲，那么它必須要離開魚去找下一家，完成它的生命周期，這是亙古不變的真理。
作者: 一片云 時間: 2016-7-27 17:32
本帖最后由 一片云 于 2016-8-9 12:04 編輯
下面簡單介紹一下鯽魚的粘孢子蟲。
左上角這張就是因?yàn)楹礞咦右鸬乃吏~，養(yǎng)殖戶還是要注意一點(diǎn)，死魚亂堆亂放是一個是很不正確的方式，因?yàn)橹灰掠�，所有魚分解以后的孢子又會回到池塘里面，如果池塘里面有水蚯蚓，那么你這個池塘就是一個病原庫，往外排，會污染別人，最嚴(yán)重一點(diǎn)就是我們做了一個調(diào)查，溝河里面的鯽魚也已經(jīng)有很嚴(yán)重的喉孢子蟲的感染，為了產(chǎn)業(yè)的持續(xù)發(fā)展，我們還是要做到科學(xué)合理的防控，某些專家在極力倡導(dǎo)的一點(diǎn)就是怎么做到生物安全防控，個人認(rèn)為過于嚴(yán)格，不大適宜于當(dāng)年我國的池塘養(yǎng)殖實(shí)際。
但是基本上安全的保護(hù)措施還是非常有必要的，舉個例子，前段時間非洲爆發(fā)埃博拉，埃博拉防控措施做得最好的不是那些最有錢的國家，也不是最窮的國家，而是隔離措施做得最好的國家。做隔離生物安保是一個基礎(chǔ)，但是現(xiàn)在的鹽城地區(qū)，我估計整個水域都有孢子蟲，區(qū)別在于有的池塘全年不清塘，氨氮比較高，里面有毒物質(zhì)比較高，池塘里面可能沒有水蚯蚓，而有的地方有水蚯蚓。
右邊已經(jīng)出現(xiàn)細(xì)菌性繼發(fā)感染出血的喉孢子蟲病病魚，其它的鰓孢子、腹孢子，常見的五種孢子蟲病，喉孢子是危害最嚴(yán)重的，其它的腹孢子以前一直以為感染比較低，但今年也發(fā)現(xiàn)感染也很嚴(yán)重的，這幾年也發(fā)現(xiàn)很小的苗種也開始感染了，而且感染率逐漸的提高。
作者: 一片云 時間: 2016-7-27 17:32
本帖最后由 一片云 于 2016-8-9 12:06 編輯
五、科學(xué)防控
防控的基礎(chǔ)是三圈理論，我們知道了病原，也知道了它感染的兩種宿主，一個是水蚯蚓，一個是魚，然后是養(yǎng)殖的水環(huán)境，我們怎么樣去控制它呢？
我們剛才說了先要找到它的薄弱環(huán)節(jié)，一個是如果你能夠控制池塘里面的水蚯蚓，第二個找到它什么時候釋放放射孢子蟲，也就是感染源，然后把這個兩個直接把它掐斷，放射孢子接觸不到魚就不會發(fā)生感染了。
池塘生態(tài)系統(tǒng)里面有很多東西，除了魚，還，有浮游動物，浮游藻類，底棲動物，水生植物等，構(gòu)成一個健康的生態(tài)系統(tǒng)，但為什么在天然沒有高密度養(yǎng)殖就不會發(fā)病，密度高了就會得病呢？
有幾個原因，我總結(jié)了一下：養(yǎng)殖模式，養(yǎng)殖經(jīng)驗(yàn)，特別是防病的理念。我們把硫酸銅、硫酸亞鐵、敵百蟲直接放下去，完了以后把浮游動物全部殺死，你不知道浮游動物能夠吃水里面的放射孢子蟲，還有螃蟹能夠吃水蚯蚓，也就是說像我們?nèi)说昧鞲幸粯�，如果你在通風(fēng)環(huán)境可能不那么容易發(fā)流感，你在一個相對密閉的環(huán)境里面，這里流感病毒沒有地方走，如果有一個病原在里面，它會進(jìn)行復(fù)制，復(fù)制以后大量釋放到比較小的空氣里面，比較小的空氣里面病毒的濃度就會比寬敞的高，這個孢子蟲在池塘里面是一樣的。
作者: 一片云 時間: 2016-7-27 17:35
本帖最后由 一片云 于 2016-8-10 14:52 編輯
粘孢子蟲有脊椎動物宿主和無脊椎動物的宿主，從防控的角度講的話，怎么樣從脊椎動物宿主防控呢？一就是培養(yǎng)抗粘孢子蟲的宿主，例如鯽魚的中國3號，當(dāng)時中國3號有一個宣傳能夠抗腹孢子也就是吳李碘泡蟲。
這個工作確實(shí)是經(jīng)過驗(yàn)證的，雖然沒有在感染平臺上驗(yàn)證，只是在同一個池塘里面，有高背鯽、中國3號，發(fā)現(xiàn)池塘，高背鯽的感染率很高，中國3號感染率非常低，這可以說明中科三號能夠抵抗一定程度的，但不是100%的，因?yàn)槿魏蔚目剐云贩N如果感染源的豐度高非常了也是抵抗不住的。
從養(yǎng)殖動物脊椎動物宿主來講，那就是混養(yǎng)，輪養(yǎng)�；祓B(yǎng)剛才說了一些非特異性宿主會消降池塘里面感染源放射孢子蟲的豐度，如果是輪養(yǎng)的話，休耕是最好的方式，休耕池塘里面可能就不會有水蚯蚓，即使有水蚯蚓它也會把池塘里面遺留的粘孢子蟲吃光，如果找不到易感宿主，那么它的世代就完成不下去，自然也就滅亡了。
還有現(xiàn)在所謂的應(yīng)激性病還或者病毒病，因?yàn)闆]有有效的辦法防控，所有都寄希望于免疫增強(qiáng)劑會有效果，在抗寄生蟲和粘孢子蟲方面也是有很多報道，免疫增強(qiáng)劑沒有做過具體的實(shí)驗(yàn)，我不知道到底有沒有效果，但是我估計是有效果的，因?yàn)槊庖咴鰪?qiáng)劑是提高機(jī)體免疫力的，如果真是做了這方面實(shí)驗(yàn)，推薦了這個東西，我建議在當(dāng)下養(yǎng)殖條件下還是用一些，因?yàn)橐膊皇翘F，一些多糖，因?yàn)榧瓤梢砸种萍纳x，又可以提高機(jī)體的免疫力。
然后無脊椎動物宿主里面，從研究的角度來講，養(yǎng)殖戶不可能進(jìn)行池塘底泥的改造，我們都知道養(yǎng)殖戶池塘的底泥都不會去清理的，更不用說底泥的改造了。但對培育觀賞魚的，底泥改造還是可行的如果是沙質(zhì)的底，蘇氏尾鰓蚓這種比較大的水蚯蚓在沙子里面容易斷而死亡。
完了之后就是用藥殺了，比如用殺釘螺的藥去殺水蚯蚓，清塘的時候生石灰和二氧化氯是有用的，蝦蟹能夠吃掉水蚯蚓，這個是生物操控，也是可以用的。
作者: 直言居士 時間: 2016-7-29 09:50
很好的學(xué)習(xí)材料，謝謝章博士分享！期待博士的詳解！
作者: myxozoa 時間: 2016-7-29 21:00
直言居士 發(fā)表于 2016-7-29 09:50 
很好的學(xué)習(xí)材料，謝謝章博士分享！期待博士的詳解！
抱歉我現(xiàn)在進(jìn)不去直播間了
作者: 一片云 時間: 2016-7-29 22:29
本帖最后由 一片云 于 2016-8-10 14:53 編輯
研究發(fā)現(xiàn)不同的水蚯蚓，同一種有不同的基因型，不同的基因型抗某種孢子蟲的能力是不一樣的。我不建議殺水蚯蚓，因?yàn)樗浅靥辽鷳B(tài)系統(tǒng)的一部分，對生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性是有用的，如果你能夠把一些抗孢子蟲的物種放進(jìn)去，一來可以預(yù)防發(fā)病，二來能夠更好維持池塘生態(tài)的穩(wěn)定性。
這張片子就是從病原的角度來講的，水產(chǎn)行業(yè)有這樣那樣太多的問題，實(shí)際上有一個原因，也不是說養(yǎng)殖戶怎么樣，確實(shí)是進(jìn)入的門檻低，，個人也希望養(yǎng)殖戶特別是年輕一代的水平在提高，他們?nèi)菀捉邮芤恍┬迈r事物。
同一種的孢子蟲對不同的地域來源的鯽魚的毒力也是不一樣的，這是我們國家還沒發(fā)現(xiàn)，因?yàn)槲艺{(diào)查了十幾個省份的喉孢子蟲，我們用的標(biāo)記發(fā)現(xiàn)是沒有差異的，也就是說我推斷是沒有毒力差異。美國人在鮭鱒魚里面發(fā)現(xiàn)不同的基因型孢子蟲對鮭鱒的毒力是不一樣的，致死率也不一樣。不同基因型的水蚯蚓對粘孢子蟲的抵抗力也是不一樣的，左邊有放射孢子蟲，右邊是加了抗性的水蚯蚓，它對不同樣的粘孢子蟲抵抗力是不一樣的。
有一個很重要的防控方法就是要做SPF標(biāo)苗，因?yàn)槲覀冊谔K北做了這么多年，有些塘口確實(shí)是一條水蚯蚓都沒有，它為什么得病有兩個原因，第一個原因是水源傳播的，從別的塘口帶來的，第二個原因就是苗種帶來的，因?yàn)楹礞咦�、腹孢子傳播時間非常的長，當(dāng)然跟溫度也有關(guān)系，溫度不一樣，發(fā)育的快慢也就不一樣。
所以我大致分了一下，有水蚯蚓的叫做內(nèi)源性塘口，能夠維持整個生活史的周期，還有一個是外源性塘口，外源性塘口是水源和苗種帶來的感染源。苗種的檢驗(yàn)檢疫是非常重要的，我們國家早就規(guī)定了苗種的跨境檢驗(yàn)檢疫是必須要做的，但是沒有人去做這個事。
SPF苗種對外源性塘口是非常非常有效的防治方法，甚至一點(diǎn)藥物都不用，如果你是外源性塘口，喉孢子蟲病你一點(diǎn)藥物都可以不用，在水源口加上一個沙濾或者UA消毒的話，可以用來控制水源的傳播。
作者: 郭海振 時間: 2016-7-29 22:54
謝謝版主提供這次學(xué)習(xí)機(jī)會
作者: 南海漁醫(yī) 時間: 2016-7-30 21:05
好材料，好好學(xué)習(xí)
作者: seafish 時間: 2016-8-3 16:51
很好的學(xué)習(xí)材料，謝謝章博士分享！微孢子蟲專家！
作者: 一片云 時間: 2016-8-9 12:14
如果水里面的水蚯蚓和放射孢子蟲沒有控制住，那么這個時候我們就只能用藥物阻斷感染，然后水里面的放射性孢子蟲我們現(xiàn)在有一種藥物（當(dāng)然現(xiàn)在成本有一點(diǎn)高），這個是能夠滅活水柱中的放射孢子蟲的，我們看右邊的這張圖，用藥物處理的整個孢子就會崩解，崩解以后就沒有感染活力了，它就不能侵染魚了。另外，對于已經(jīng)進(jìn)入魚體的蟲子如果魚還能吃料的話，口服藥物是能阻斷它發(fā)育的。
下面這張病害防治的照片也是我剛才講了這只是一個實(shí)驗(yàn)證據(jù)，我們在實(shí)驗(yàn)室里面用的劍水蚤，水體里面的浮游動物對放射性的孢子蟲有消降功能的，劍水蚤放到放射性孢子蟲的水里面會降低孢子蟲的豐度，混養(yǎng)對孢子蟲的消降也是很厲害的，這就給我們通過培養(yǎng)浮游動物、混養(yǎng)的提供了理論基礎(chǔ)。
作者: 一片云 時間: 2016-8-9 12:15
本帖最后由 一片云 于 2016-8-9 12:16 編輯
水溫對工廠化養(yǎng)殖是有效的，水溫也會水蚯蚓的發(fā)育和影響放射孢子蟲在魚體內(nèi)的發(fā)育，水溫也會影響放射孢子蟲在水里面的存活時間。工廠化養(yǎng)殖如果能夠控制水溫也是對孢子蟲防控的一種方式，但是對開放式養(yǎng)殖池塘養(yǎng)殖、網(wǎng)箱養(yǎng)殖操作不大現(xiàn)實(shí)。
水溫不一樣，水溫越高死亡越快。
流速對池塘養(yǎng)殖也沒有效果，但是網(wǎng)箱養(yǎng)殖有效，雖然我們現(xiàn)在沒有報道，但是海水防治小瓜蟲已經(jīng)在使用了。
作者: 一片云 時間: 2016-8-9 12:16
底質(zhì)對于觀賞魚類控制孢子蟲病是有效果的，我們國家觀賞魚孢子蟲沒有多嚴(yán)重，在以色列、日本、韓國觀賞魚的孢子蟲是非常嚴(yán)重的，而且特別是金魚。
當(dāng)然還有一些最新的研究成果，是我的一個師兄做的，他從天津一個發(fā)病的池塘分離到一種菌株，能夠分泌一種酶，這種酶能分解孢子蟲的外殼，也就是幾丁質(zhì)酶活性的菌株。
至少現(xiàn)在來講用于防控不太現(xiàn)實(shí)，但是如果以后我們能夠用大數(shù)據(jù)能夠弄清楚健康的生態(tài)系統(tǒng)里面需要什么東西，而且能夠人為補(bǔ)充，像現(xiàn)在的調(diào)水生物制劑一樣，就可以撒到水里面去降解它，這樣即便有水蚯蚓，但是沒有感染源，也可以控制粘孢子蟲病。
作者: 一片云 時間: 2016-8-9 12:41
簡單總結(jié)一下，基于對病原的認(rèn)識，我們有三種方法，一個是培養(yǎng)抗性品種，
另外一個就是藥物，切斷它的生活史，如處理水蚯蚓，滅活放射性孢子蟲等，阻斷孢子蟲的發(fā)育，在中間把它阻斷了等，第三是基于養(yǎng)殖模式，混養(yǎng)、休耕。
大家可能由于藥物防病的根深蒂固，很多藥物有報道，但是這個表里面大部分我都沒有做過實(shí)驗(yàn)，我只做過簡單的幾種，大部分是國外文獻(xiàn)報道的，估計還是會有點(diǎn)效果，你們也可以去試一下。
如果能夠去查閱國外文獻(xiàn)的，包括臺灣、日本、韓國的文獻(xiàn)的養(yǎng)殖從業(yè)者們，可以去查閱，畢竟我們國內(nèi)的特別是寄生蟲類的研究人員過少，這可能也跟我們的體系有關(guān)系，我們的力量的的確是有限的，當(dāng)然我們水生所作為研究層面的國家隊，有很多的病和病原我們是沒有搞清楚，所以我建議有這方面興趣的朋友可以去尋求外面的，集大家之所長，可能對我們病害的防控有效果。
還有就是生物防控，剛才我已講了一些，總結(jié)一下，疫苗的，但是寄生蟲的疫苗基本上不太現(xiàn)實(shí)，因?yàn)槿说囊呙缤读四敲炊嗟缅X做練習(xí)都沒有做得很成功。
疫苗是一個趨勢，我不是說疫苗不好，寄生蟲比復(fù)雜得多，疫苗是非常難的。抗性遺傳的引用和混養(yǎng)等都已經(jīng)講過。
還有一些物理的防控，如果你能夠控制苗種不帶蟲的，能夠控制進(jìn)水不帶蟲的，那我建議你有條件的話鋪一個像養(yǎng)蝦一樣的高位池地膜，對內(nèi)源性塘口，可能就可以阻斷水蚯蚓釋放出來的放射性的孢子蟲，但這個可能不太現(xiàn)實(shí)，我只是建議，對于外源性塘口，在進(jìn)水口加一些水處理的設(shè)備，還是比較不錯的選擇。尤其對培育苗種的，不管是標(biāo)粗的，對于培養(yǎng)苗種還是非常可行的。
作者: 一片云 時間: 2016-8-9 12:42
總結(jié)一下：
從病原的角度上防控粘孢子蟲病，只能從魚種、鮮活餌料、地表徑流進(jìn)水帶來的危害。
我怎么發(fā)現(xiàn)呢，特別是潛伏感染的？跟大家講一個概念——精準(zhǔn)，其實(shí)防病應(yīng)該像人一樣做到精準(zhǔn)治療，不光是對癥，對病癥更應(yīng)該是對因防控的，我所說的對因防控那肯定是病原性病那就應(yīng)該要找到病因，通過病因來防控，如果是通過免疫增強(qiáng)劑，或者是調(diào)節(jié)水環(huán)境還是增強(qiáng)體質(zhì)都是可以緩解的，或者減少損失，但它不是一個最終的解決方案，最終的方案是對病原的，因?yàn)椴≡绻刂坪昧�，不感染了，體弱的魚也不會死，也能夠達(dá)到上市規(guī)格。
作者: 一片云 時間: 2016-8-9 12:43
六、當(dāng)前幾種常見的粘孢子蟲
因?yàn)榇蟛糠逐B(yǎng)殖從業(yè)者想要認(rèn)識一下幾種比較嚴(yán)重的病，我把這些病的圖片給大家看一看。
第一個是丑陋圓形碘泡蟲，腸道中間這個片子，大概是我養(yǎng)到11月份的時候從左邊這個好嚇人的魚養(yǎng)到這里大部分老化了，老化掉了，這個時候如果控制了細(xì)菌的繼發(fā)感染的話就不會什么死魚了。
作者: 一片云 時間: 2016-8-9 12:44
第二種是鰓孢子蟲的一種，鰓上大概有二三十種粘孢子蟲，袁圣在苗種階段發(fā)現(xiàn)的鰓孢子，學(xué)名叫汪氏單極蟲，在鰓弓上，我個人認(rèn)為不會有很嚴(yán)重的病害，因?yàn)榇蟛糠謺芸斓拿撀�，你用促包囊脫落的藥如環(huán)烷酸銅是有些效果的。
第三種就是膚孢子蟲病，因?yàn)榧纳隰~的皮膚里面，長大以后會把鱗片給撐起來，看到凹凸不平的，而我們看到中間一些產(chǎn)生自身免疫反應(yīng)的黑色素，不會引起非常嚴(yán)重的炎癥反應(yīng)，盡管有些人告訴我這個蟲子感染以后也會有些畸形，這個我沒有做過具體的研究，因?yàn)楫?dāng)時在我實(shí)驗(yàn)室我也養(yǎng)了，把體表大概有二三十個包囊的魚放到水族箱里面養(yǎng)，最后我大概養(yǎng)了不到三十天，所有的蟲都脫落了，魚的鱗片保存的非常整齊，沒有表現(xiàn)這種畸形的，我估計也是其它應(yīng)激導(dǎo)致的，因?yàn)轲B(yǎng)殖環(huán)境不會像實(shí)驗(yàn)室控制得那么好的水體。當(dāng)時我們密度放得很低。
作者: 一片云 時間: 2016-8-9 12:44
第四個是我們最關(guān)心的喉孢子，鰓出血這么厲害我也不認(rèn)為喉孢子有減少了，特別在蘇北，整個水域里面都有喉孢子的污染，鰓出血出來以后，掩蓋了喉孢子的危害而已。
還有一些不是引起很嚴(yán)重危害的，一來感染率比較低，二來是它寄生的部位不一樣，蟲寄生在魚體的不同部位，對于魚的損傷是非常非常，就像人一樣，你臉上長個瘤，和你腎臟和心臟長個瘤是完全不一樣的概念，感染不一定發(fā)生。
其實(shí)不是因?yàn)樗貌∠�，而是我們沒怎么喂它，所以魚顯得很瘦
作者: 一片云 時間: 2016-8-9 12:46
然后就是吳李碘泡蟲，吳李碘泡蟲就是我們說的肝孢子、腹孢子，我在日本的時候在鯽魚的鰓上檢測到了，它是串狀的，當(dāng)時因?yàn)槭怯^賞魚對它危害很大，把這個拿出來是因?yàn)橹拔覍@個很感興趣，我一直以為寄生蟲有很強(qiáng)的寄生部位特異性，寄生在肝臟，不會寄生在鰓上。我現(xiàn)在還在懷疑它們到底是不是一個種。
還有一個鰓孢子蟲就是瓶囊碘泡蟲，這一兩個胞囊在鰓上么有必要?dú)㈡咦酉x了，一來你到這個階段你也殺不了，它自然老化會脫落的，你只要控制它不要有其它的感染這個是最好的選擇，第二就是你不殺它，他自己也會掉。
多涅茨尾孢蟲也是寄生在鰓上的，一個帶尾巴的，可能長得也比較好看，這個肉眼能看到的孢子蟲，包括所有的寄生蟲，車輪蟲，指環(huán)蟲等幾個蟲在鰓上再正常不過了，現(xiàn)在研究腸道微生物這么火就告訴我們很多細(xì)菌是有用的，不是有害的，可能我們有一天也會發(fā)現(xiàn)，孢子蟲對于維持魚體的正常機(jī)體是有用的。
作者: 一片云 時間: 2016-8-9 12:47
這一張是鯉魚的，也是寄生在腸道里面，也會在皮膚上，我昨天才能湖北潛江采到大量感染的吉陶單極蟲，在以色列、韓國、日本觀賞魚上比較貴的金魚上動手術(shù)，用手術(shù)切除了腸道并縫針。鯉魚有鯉魚的粘孢子蟲，鯽魚有鯽魚的粘孢子蟲，不同魚有不用魚的粘孢子蟲，引起病害的肯定是特定魚的，我在下面塘口走的時候發(fā)現(xiàn)，有些專家竟然用檢測膚孢子的方法來判斷魚有沒有感染喉孢子，我覺得這個是無稽之談，每一種粘孢子蟲有每一種粘孢子蟲的感染習(xí)性，就像每個人有每個人的個性，所以，千萬不能混為一談，這也是我把這個蟲子的照片放在里面的原因。每一種蟲子大家要能夠大概認(rèn)識一下，特別是防控不能混在一塊。
這張是我在海南做的石斑魚，這幾年石斑魚的寄生蟲很嚴(yán)重，病毒性病對石斑魚標(biāo)苗損失最大，但是這個也一點(diǎn)不比病毒弱。
這張是鯽魚感染的，但是它不會引起病害的，如果你拿到顯微鏡下看，如果看到這種千萬不要告訴人家去殺蟲，因?yàn)槟銡⒘艘矝]用。
作者: 一片云 時間: 2016-8-9 12:48
總結(jié)：
我剛才總結(jié)的防控策略還是基于這個圖，就是三個×，基于這三個階段，如果能夠做好這三個階段是最好的，不容易做，特別在水里面放射性孢子蟲的豐度如何去定量，跟我們合作的一些塘口，是可以做到精準(zhǔn)的，每天都監(jiān)控池塘里面的感染強(qiáng)度，但也不能像現(xiàn)在有一些公司推薦完全不用藥，這也是錯誤的，個人認(rèn)為是，換了一種概念。我覺得用藥一定要做到精準(zhǔn)，什么時候用，為什么用。
作者: 一片云 時間: 2016-8-9 12:49
七、關(guān)于當(dāng)下和未來寄生蟲病害防控的思考。
有病先殺蟲我不知道是哪位先生提出來的，至少在我讀書的時候每次開會都聽到有人在上面這么說。雖然有一定的道理，但是這不是科學(xué)的一句話，蟲不是萬惡之本，為什么有病先殺蟲，雖然蟲導(dǎo)致機(jī)體損傷比較大，是病毒和細(xì)菌進(jìn)入的一種方式，但不是唯一的方式。有病先殺蟲，如果是對的話，你也要知道為什么要?dú)⑾x，是蟲引起的，是蟲誘發(fā)的，還是蟲產(chǎn)生毒素了，然后導(dǎo)致魚發(fā)病了、死亡了，這個要搞清楚。
其次要知道怎么殺蟲，你不能把水里面的所有的蟲都?xì)⑺溃覄偛耪f了蟲也是水里面的一份子，不能因?yàn)槿祟惤y(tǒng)治世界，可能有些蟲也是有益的。
怎么殺蟲呢，精準(zhǔn)殺蟲，什么階段殺蟲這個蟲是最容易殺的，什么階段的蟲殺不了，你殺也沒用呢，除了造成水環(huán)境的不穩(wěn)定，你沒有任何益處，反而把這個病治壞了，所以一定要搞清楚怎么殺蟲。
然后提兩種概念，怎樣科學(xué)防控寄生蟲病害，粘孢子只是舉一個例子，因?yàn)檎虫咦酉x我能夠講透徹，其他的蟲比如說車輪蟲，它不需要中間宿主，但是現(xiàn)在也沒有幾個人能夠追蹤到車輪蟲在水體里面的怎樣的生存，在水里面是什么樣的狀態(tài)，雖然它沒有中間宿主，車輪蟲有沒有可能的傳播載體呢？打個比方，車輪蟲如果是從底泥里面釋放出來的，沒有游動能力它怎么上來去感染上層的魚類呢？這都需要去搞清楚，只有建立在寄生蟲的整個生物學(xué)背景了解清楚了，我們才能夠科學(xué)防控理念，才有科學(xué)防控的基礎(chǔ)。
回到兩個概念：不能什么蟲都?xì)ⅲx也是生態(tài)系統(tǒng)的一部分。第二是要做到精準(zhǔn)殺蟲，知道做到什么什么該殺，什么時候不該殺，怎么殺。
值得大家去關(guān)注的一個問題，我們養(yǎng)殖里面產(chǎn)生這么多病原、病害，養(yǎng)殖的池塘或者網(wǎng)箱已經(jīng)形成一個病原庫，我們排水的時候，這些病原到哪里去了呢？會不會影響非水養(yǎng)殖區(qū)的環(huán)境，影響非養(yǎng)殖的生物，這個需要大家一起來關(guān)注，才可能讓我們這個產(chǎn)業(yè)持續(xù)健康的發(fā)展。
作者: 一片云 時間: 2016-8-9 12:50
到此就更新完畢了，歡迎大家收藏和分享
作者: wx_RrOTtcls 時間: 2016-8-12 09:15
很棒，分享中更肯定了生態(tài)/微生態(tài)養(yǎng)殖，構(gòu)建生物鏈平衡勢不可擋
作者: 一片云 時間: 2016-8-12 09:42
wx_RrOTtcls 發(fā)表于 2016-8-12 09:15
很棒，分享中更肯定了生態(tài)/微生態(tài)養(yǎng)殖，構(gòu)建生物鏈平衡勢不可擋
這個版本是根據(jù)錄音進(jìn)行整理的，沒有很多編輯，是希望大家能夠更好的理解，所以篇幅有些長
作者: 江東 時間: 2016-8-23 08:08
棒棒棒棒棒棒棒棒
作者: 江東 時間: 2016-8-23 08:09
棒棒棒棒棒棒棒
作者: 楓少 時間: 2016-11-14 22:02
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