最早發(fā)現(xiàn)者:2002年時(shí)于巴西第一次發(fā)生傳染性肌肉壞死病毒(Infectious Myonecrosis Virus, IMNV) 主要危害白蝦(南美白對蝦,L. vannamei), IMNV 為一個(gè)全新的病毒(Lightner et al 2004; Poulos et al 2006) 之后于亞洲之印尼亦發(fā)生同樣疾病(Senapin et al 2007)
感染器官及組織:病毒主要存于具有橫紋肌組織如肌肉或心肌(較少)其它如結(jié)締組成(connective tissues),血球細(xì)胞 (hemocytes)及類淋巴組織中之實(shí)質(zhì)細(xì)胞 (lymphoid organ parenchymal cells)等。
疾病型態(tài)及流行病學(xué):可水平感染(horizontal transmission)如經(jīng)污染水原及殘食病蝦等。
重垂直感染(vertical transmission )被認(rèn)為極有可能,但尚未被實(shí)驗(yàn)証明。
本病在一些商業(yè)雜志上估計(jì)單于2002-2004年間損失已超過美金2,000萬元以上,且最近更多,單一巴西于近年來因IMNV感染蝦之損失已超過美金1億以上 (Nunes et al., 2004)。
臨床狀況及病理學(xué)
感染之病蝦特別于腹節(jié)部及尾扇部之肌肉會(huì)呈現(xiàn)出大區(qū)域之白色壞死,在一些個(gè)別病蝦一但有緊迫(stresses) 如捕捉或突然的鹽度或水溫之改變等,會(huì)呈現(xiàn)出壞死與體色變紅等情況。疾病發(fā)生時(shí)其高死亡率常?沙掷m(xù)日。
病蝦于剖檢時(shí)常出現(xiàn)類淋巴器官比正常時(shí)肥大(hypertrophied)約3-4倍。 主要病變于肌肉(skeletal muscle )及淋巴器官(lymphoid organ) 。如將病蝦之病變肌肉直接壓片于位像差顯微鏡下檢查可看出肌肉之橫紋消失(loss of the normal striations)同時(shí)可觀察到肌纖維之碎片。于淋巴器官中可見大量之淋巴器官腫節(jié)((lymphoid organ spheroids or LOS) 圍繞于正常淋巴器官tubules之間。
診斷方法: 1、感染之病蝦特別于腹節(jié)部及尾扇部之肌肉會(huì)呈現(xiàn)出大區(qū)域之白色壞死。
2、于一般病理切片經(jīng)H&E 染色觀察下可見:急性期(acute phase)可見到肌肉呈現(xiàn)凝固樣壞死(coagulative necrosis of striated muscle) 同時(shí)常伴隨有嚴(yán)重之水腫(marked edema),但往往蝦只常有急性期及一些老之病灶混合一起,所見有凝固樣壞死到液化壞死(liquefactive necrosis)同時(shí)伴隨有血球細(xì)胞(hemocytes)之浸潤與推積(infiltration and accumulation)。之后有些肌肉組織會(huì)被一些疏松之fibrocytes 及結(jié)締組織所取代,其間有hemocytes 及一些再生之肌纖維出現(xiàn)(presumed)。
不論于急性或慢性之病灶中于肥大之淋巴組織中可見淋巴器官腫節(jié)之推積,這些淋巴器官腫節(jié)(LOS)亦會(huì)出現(xiàn)于其它組織如鰓、心臟或神經(jīng)索中。
3RT-PCR 方法:
使用Andrade et al 2007 所使用之方法 一般之RT-PCR
Total RNA:使用組織部位以腹部之肌肉為佳,并以 High Pure RNA tissue extraction kit (Roche Biochemical) 抽total RNA 或使用invitrogen 之trizol亦可。
Nested RT-PCR
第一次RT-PCR 所使用之引子對為4587F and 4914R (5′-CGA CGC TGC TAA CCATACAA-3′ and 5′-ACT CGG CTG TTC GAT CAA GT-3′,
respectively), 產(chǎn)物大小為328bp 反應(yīng)使用 GeneAmp EZ rTth RNA PCR kit (Applied Biosystems),
nest-PCR 所使用之引子對為 4725NF (5′-GGC ACA TGC TCA GAG ACA-3′) and
4863NR (5′-AGC GCT GAG TCC AGT CTT G-3′) 其產(chǎn)物為139bp
其它條件為可參考 Andrade 2007