[病例318]
福建漳州詔安縣一牛蛙養(yǎng)殖場，土池淺水養(yǎng)殖牛蛙（如圖1），平均每個池塘15~20平方米，放養(yǎng)密度100~120只/ 平方米。
2012年3月份開始上料以后就逐漸有發(fā)病，初期主要是內臟出現(xiàn)“套腸”，當時用抗生素后死亡下降，但沒有根治，之后出現(xiàn)白內障、歪頭、爛頭、打轉等癥狀。死亡時四腳伸直，身體僵硬。
2012年8月13日到場調查，在池塘中見大量歪頭、爛頭的牛蛙（見圖2、圖3），從塘中分別取出2只歪頭、2只爛頭以及2只無明顯疾病癥狀的牛蛙。外觀歪頭的牛蛙患有白內障（見圖4），解剖見牛蛙具有“套腸”癥狀（見圖5），其中爛頭的牛蛙腹腔有大量腹水（見圖6）。兩只正常牛蛙無明顯病變。分別從所取牛蛙的腦、肝臟、心臟、肌肉以及腹水中接種，普通營養(yǎng)瓊脂進行細菌分離培養(yǎng)，并取肝、脾、腎、腦、腸和眼等組織分別用95%酒精和波恩氏固定液固定進行病毒檢測和組織病理切片觀察。
結果：從歪頭的牛蛙（NW-1）和爛頭的牛蛙（NW-3）中分離出兩株細菌（見圖7），經過16S rDNA測序鑒定都為腦膜炎敗血黃桿菌（見圖8），病毒檢測結果顯示，所采6只牛蛙的組織（見圖9），PCR檢測均能擴增出與預期片段大�。ㄍ芎绮什《緳z測引物為545bp）相符的目的片段，將目的片段純化后測序，序列經NCBI比對，其與GenBank中蛙虹彩病毒序列同源性為99.4%，因此可判定牛蛙感染蛙虹彩病毒。組織病理切片觀察顯示肝臟嚴重水變性（見圖10），腎臟腎小管腫脹（見圖11），其它組織均正常。
分析：1、腦膜炎敗血黃桿菌也稱為腦膜膿毒性金黃桿菌，可以引起人類腦膜炎等疾病，在蛙類也有較多致病報告，張奇亞等（1999）在“旋游癥”美國青蛙腦組織分離到該菌，周永燦等（2001）在白內障和歪脖子虎紋蛙的眼、血、肝、腦、腹水分離到該菌，陳耀明等（1994）在發(fā)病牛蛙的肝臟和腹水中分離到該菌，葉雪平等（1996）在歪脖子的牛蛙腦部分離到該菌。本病例從患病牛蛙腦部也分離到該菌，發(fā)病牛蛙具有典型的歪頭、白內障、共濟失調等典型的蛙腦膜炎的癥狀。
2、據(jù)A. Cunningham（2008）蛙感染虹彩病毒后主要表現(xiàn)兩個發(fā)病癥狀：皮膚潰瘍和全身性出血。本病例中所采6只牛蛙均能檢測出蛙虹彩病毒，很多發(fā)病蛙頭部皮膚局部脫落腐爛，因此蛙虹彩病毒在本病例中可能也起到了一定的致病作用。（利洋研究所 雷燕 戚瑞榮 利洋技術部 唐紹林提供 2015.01.29）
