2011年石斑魚NNV（腦神經(jīng)壞死病病毒）口服疫苗的成功研發(fā)，給飽受病害之苦的石斑魚,尤其是育苗產(chǎn)業(yè)注入了一劑強(qiáng)心針，而研發(fā)團(tuán)隊的領(lǐng)頭人，正是臺灣國立成功大學(xué)生物科技所楊惠郎教授。
NNV疫苗研發(fā)成功意義重大，NNV在石斑魚苗期感染具近100%致死率，被認(rèn)為是國際養(yǎng)殖高價魚種中最棘手的病毒之一，楊及其團(tuán)隊歷時8年，成功突破此口服疫苗關(guān)鍵技術(shù)，不但解決了國際石斑育苗病毒感染的產(chǎn)業(yè)問題，更是國際首次證明可在稚魚階段有效預(yù)防疾病的創(chuàng)新發(fā)明。在此之前，臺灣和大陸均無公開報道過此類成熟疫苗產(chǎn)品出現(xiàn)，楊也因此被稱為臺灣石斑魚疫苗領(lǐng)域的權(quán)威之一。目前楊及其團(tuán)隊正將此技術(shù)應(yīng)用于生產(chǎn)高抗病力石斑魚苗，以供石斑魚養(yǎng)殖戶使用。
可以預(yù)見的是，疫苗已被公認(rèn)為是水產(chǎn)養(yǎng)殖病害防治最佳手段之一，楊的研究方向未來潛力巨大。無獨(dú)有偶，同樣在2011年，珠江水產(chǎn)研究所研發(fā)的草魚出血病活疫苗獲國家新獸藥證書，并拿到水產(chǎn)疫苗生產(chǎn)批文，成為大陸首個拿齊出生紙，可以商品化的水產(chǎn)疫苗。
臺灣的水產(chǎn)養(yǎng)殖技術(shù)已有深厚產(chǎn)業(yè)根基，也一向是亞洲水產(chǎn)種苗的供應(yīng)中心，暖水魚種之養(yǎng)殖技術(shù)領(lǐng)先國際，在以知識經(jīng)濟(jì)為基礎(chǔ)的高科技時代，臺灣有機(jī)會可以成為國際暖水魚種養(yǎng)殖之技術(shù)中心。但也因臺灣的經(jīng)濟(jì)特性，養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展朝向密集養(yǎng)殖的模式，因此提早面臨疾病叢生、死亡率高、及藥物抗生素濫用的情況，恰正重蹈二十年前未科技化的挪威鮭魚產(chǎn)業(yè)，及四十年前之畜禽養(yǎng)殖個體小戶的產(chǎn)業(yè)發(fā)展歷史。
面對國際競爭，若不針對問題，主動積極根本解決，必會影響產(chǎn)品銷售，并導(dǎo)致水產(chǎn)養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)之萎退、外移的現(xiàn)況。嚴(yán)重地阻礙水產(chǎn)養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)的永續(xù)經(jīng)營，及國際市場對臺灣產(chǎn)品的信心。于是我們認(rèn)為，要提升臺灣水產(chǎn)養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)，必須以挪威之鮭魚產(chǎn)業(yè)發(fā)展針對冷水魚種之生物技術(shù)模式為借鏡，對暖水魚種導(dǎo)入養(yǎng)殖科技化的觀念與做法，暖水魚種雖然生長效率較冷水魚種高，但是在生長型態(tài)、環(huán)境、疾病分布上，都有很大的差異，因此疾病預(yù)防及治療的方法也不相同，可惜的是，至今仍未有暖水魚種完整的疾病防治系統(tǒng)。
若想要爭取此市場，就要以建立可解決瓶頸之科技為開啟市場之鑰匙。以生物技術(shù)來研發(fā)暖水魚種疾病防治之關(guān)鍵技術(shù)產(chǎn)品(疫苗及檢驗(yàn)試劑)，并延伸用以生產(chǎn)高抗病力種苗(SPR: Special Pathogen Resistant)及整合工業(yè)化之養(yǎng)殖科技。生產(chǎn)高抗病力之健康種苗，則是國際暖水魚種水產(chǎn)養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)市場極需之關(guān)鍵產(chǎn)品，及轉(zhuǎn)型成工業(yè)化的水產(chǎn)養(yǎng)殖的關(guān)鍵。必定可以幫助臺灣掌握暖水魚種養(yǎng)殖工業(yè)的巨大商機(jī)。
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魚用疫苗及疾病預(yù)防系統(tǒng)之建立
楊惠郎
國立成功大學(xué)生物科技研究所
國立成功大學(xué)生科中心
水產(chǎn)疾病醫(yī)藥研究團(tuán)隊
hlyang@mail.ncku.edu.tw
壹、 發(fā)展前景及瓶頸
1. 利用海洋生產(chǎn)高品質(zhì)的漁貨將是國際最具發(fā)展?jié)摿Φ拿裆a(chǎn)業(yè)
由於地球人口日益增加，而可用土地逐日萎減，糧食短缺已經(jīng)是無可避免的全球重 大問題。地球70%之面積是海洋，人類民生必需之蛋白質(zhì)食品勢必轉(zhuǎn)由海洋供應(yīng)， 海面水產(chǎn)養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)將快速取代捕撈并成為主要的糧食及民生產(chǎn)品來源。據(jù)聯(lián)合國糧 食組織（FAO）資料顯示，水產(chǎn)養(yǎng)殖已是國際進(jìn)展最快，且最具發(fā)展?jié)摿χa(chǎn)業(yè)， 其優(yōu)勢及情況略述如下：
‧ 海面養(yǎng)殖每平面單位之生產(chǎn)量可達(dá)陸地養(yǎng)殖之二十倍以上。
‧ 魚之養(yǎng)殖效率遠(yuǎn)高於畜產(chǎn)，以最佳之飼料換肉率比較，魚可達(dá)0.8，而雞為1.5、豬為3.5、牛為7.0。
‧ 水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)自1980年起年成長率高達(dá)10%，遠(yuǎn)高於畜、禽產(chǎn)之養(yǎng)殖。FAO預(yù)計養(yǎng)殖魚獲將逐步取代捕撈漁業(yè)，於2030年其佔(zhàn)有率將由目前之30% 提升至50%。
更印証這發(fā)展趨勢的是，在2002年國際知名管理大師彼得‧杜拉克Peter F. Drucker 在其「下一個社會」 （Managing in the next society: Beyond the information revolution, 2002）一書中指出：
“同時毫無疑問的、預(yù)料不到的新產(chǎn)業(yè)會生現(xiàn)，其中一個已出現(xiàn)了，就是生物科技 產(chǎn)業(yè)，另一個則是養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)。今后五十年，養(yǎng)殖漁業(yè)可能會使人類放棄海上捕撈， 改為從事海洋畜牧，就像一萬年前，同樣的創(chuàng)新，使我們的祖先放棄陸上捕獵，變 成農(nóng)民與牧人”。
依高科技產(chǎn)業(yè)之發(fā)展歷史模式，科技產(chǎn)業(yè)之發(fā)展端賴新科技之研發(fā)，掌握關(guān)鍵技術(shù) 者必是此新產(chǎn)業(yè)之領(lǐng)導(dǎo)者，在養(yǎng)殖漁業(yè)正從傳統(tǒng)走高科技化的轉(zhuǎn)捩點(diǎn)、科技化養(yǎng)殖 產(chǎn)業(yè)之發(fā)展亦必屬掌握關(guān)鍵技術(shù)者。
2. 疾病是水產(chǎn)養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)發(fā)展瓶頸及科技化養(yǎng)殖的關(guān)鍵因素
我國水產(chǎn)養(yǎng)殖技術(shù)基礎(chǔ)深厚，向來領(lǐng)先國際，尤其是暖水魚種海水養(yǎng)殖技術(shù)更稱霸 全球，是加入WTO后農(nóng)業(yè)部門最具競爭優(yōu)勢的產(chǎn)業(yè)。但傳統(tǒng)的水產(chǎn)養(yǎng)殖為了創(chuàng)造 經(jīng)濟(jì)效益，為追求產(chǎn)量，使用高密度養(yǎng)殖所帶來的疾病問題，導(dǎo)致高死亡率，及不 能永續(xù)經(jīng)營之后果，造成產(chǎn)業(yè)衰微，始終是國際間水產(chǎn)養(yǎng)殖無法克服的瓶頸。目前 除了鮭魚養(yǎng)殖以外，全球的水產(chǎn)養(yǎng)殖仍然無法脫離傳統(tǒng)漁作的窠臼，水產(chǎn)養(yǎng)殖疾病 防治新科技及產(chǎn)品，將是未來水產(chǎn)養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)是否能從目前的傳統(tǒng)產(chǎn)業(yè)模式，成功的 走向科技化、工業(yè)化之水產(chǎn)養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)之關(guān)鍵。
3. 疾病防治技術(shù)之突破所延伸的商機(jī)
在市場需求日殷之產(chǎn)業(yè)市場下，以生物技術(shù)研發(fā)暖水魚種疾病防治之關(guān)鍵技術(shù)產(chǎn)品 (疫苗及檢驗(yàn)試劑)，以生產(chǎn)高抗病力種苗(SPF: Special Pathogen Resistant)；整合工 業(yè)化之養(yǎng)殖科技；掌握暖水魚種養(yǎng)殖工業(yè)的巨大商機(jī)。
冷水魚種之鮭魚養(yǎng)殖是目前全世界唯一徹底科技化、工業(yè)化的養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)。而挪威之 鮭魚產(chǎn)業(yè)從無，到掌握國際鮭魚市場，分析其中成功的因素，其發(fā)展模式就是以研 發(fā)鮭魚養(yǎng)殖科技為始，成功的疾病防治策略應(yīng)是最大功臣，全球最主要養(yǎng)殖魚產(chǎn)來 源的暖水魚種，生長效率較冷水魚種高，冷水魚與暖水魚在生長型態(tài)、環(huán)境、疾病 分布上，都有狠大的差異，因此疾病預(yù)防及治療的方法也不相同，但至今仍未有暖水魚種完整的疾病防治系統(tǒng)。因之爭取此市場，就要以可建立解決瓶頸之科技為開啟市場之鑰匙。以生物技術(shù)來研發(fā)暖水魚種疾病防治技術(shù)及產(chǎn)品(疫苗及檢驗(yàn)試劑)，生產(chǎn)高抗病力之健康種苗，則是國際暖水魚種水產(chǎn)養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)市場極需之關(guān)鍵產(chǎn)品及轉(zhuǎn)型成工業(yè)化的水產(chǎn)養(yǎng)殖的關(guān)鍵。
臺灣在水產(chǎn)養(yǎng)殖技術(shù)已有深厚產(chǎn)業(yè)根基，也一向是亞洲種苗供應(yīng)中心，暖水魚種之養(yǎng)殖技術(shù)領(lǐng)先國際，在知識經(jīng)濟(jì)為帥的高科技時代，臺灣應(yīng)是可建立成國際暖水魚種養(yǎng)殖之技術(shù)中心。但也因臺灣地小，養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展朝向密集養(yǎng)殖的模式，因此提早面臨的疾病叢生、死亡率高、抗生素濫用的情況，嚴(yán)重地阻礙水產(chǎn)養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)的永續(xù)經(jīng)營，及造成魚貨殘含抗生素之品質(zhì)問題。
此種暖水魚種之養(yǎng)殖以疾病多、死亡率高、未使用疫苗而導(dǎo)致抗生素使用過量、不當(dāng)，抗生素之殘留污染品質(zhì)等困難，恰正重蹈二十年前產(chǎn)業(yè)未科技化前挪威的鮭魚產(chǎn)業(yè)，及四十年前之畜禽養(yǎng)殖個體小戶的產(chǎn)業(yè)發(fā)展歷史。面對國際競爭，若不針對問題、主動、積極根本解決，必會影響產(chǎn)品銷售，并導(dǎo)至水產(chǎn)養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)之萎退、外移的現(xiàn)況。
作者: 水寶寶 時間: 2012-1-12 23:46
本帖最后由 水寶寶 于 2012-1-12 23:48 編輯
貳、 疫苗使用能提升存活率必會提升養(yǎng)殖利潤
我國近年來，無論本來覺得業(yè)者傲導(dǎo)國際之海鱺及石斑種苗之養(yǎng)殖，漸已面臨當(dāng)年草蝦養(yǎng)殖之瓶頸：疾病導(dǎo)致高死亡率及不能持續(xù)生產(chǎn)之產(chǎn)業(yè)瓶頸，也使政府以水產(chǎn)品進(jìn)軍國際競爭的政策，遭受重大挫折。雖眼看國際間良好的商機(jī)，但面對發(fā)展的困難，經(jīng)營的虧損，養(yǎng)殖戶無能為力，漸失經(jīng)營的信心。魚隻之死亡不但損失產(chǎn)量及養(yǎng)殖過程中之飼料之浪費(fèi)，都造成生產(chǎn)成本之高升。以本實(shí)驗(yàn)室依養(yǎng)殖期、飼料、魚苗及固定成本等參數(shù)，獲得海鱺養(yǎng)殖估算(圖一)，証明唯有提高養(yǎng)成存活率，才能降低成本，提升養(yǎng)殖利潤。
參．完整之疾病防治之體系可提升養(yǎng)殖存活率
在現(xiàn)代疾病預(yù)防及治療醫(yī)藥中，無論是人類的健康保護(hù)或禽畜產(chǎn)的養(yǎng)殖，已証明最有效的疾病防治之體系，包含
(1). 生長或養(yǎng)殖環(huán)境之營理，
(2). 養(yǎng)殖動物之營養(yǎng)
(3). 疾病之預(yù)防三大要件。
在疾病防治之體系之使用，則先以疫苗預(yù)防疾病，以檢驗(yàn)試劑確定病原，再以對癥之醫(yī)藥(含抗生素)來治療疾病，這三大醫(yī)藥關(guān)鍵零組件之齊備，才能組合成為現(xiàn)代疾病防治之體系。在水產(chǎn)養(yǎng)殖之過程中，必需有適當(dāng)?shù)聂~用疫苗可用來生產(chǎn)高抗病力之魚苗，以事先預(yù)防未可預(yù)測及突發(fā)的疾��；不同之檢驗(yàn)試劑在病情初發(fā)期可快速確定病原及相關(guān)抗藥性，以對癥下藥并可檢測疫苗免疫之效用，抗病力之監(jiān)控及作為魚苗品質(zhì)之檢定；而醫(yī)藥可只使用於病原已確定、抗藥性已偵測過之細(xì)菌，作有效，正確的治療。此疾病防治系統(tǒng)已在人類使用多年、效果也証明良好。在畜產(chǎn)業(yè)上之使用也逐漸取代以抗生素預(yù)防疾病之劣習(xí)。魚產(chǎn)業(yè)中、挪威及歐美也沿用多年証明正確有效。但目前暖水魚種養(yǎng)殖上，疫苗及檢驗(yàn)試劑之一併研發(fā)極為迫切，也只有這二件關(guān)鍵零組件之建立，方能配合醫(yī)藥來組合暖水魚種的疾病防治之體系。
肆、疫苗能大量減少或避免抗生素之使用: 挪威使用疫苗之范例
使用疫苗預(yù)防疾病除了在人類應(yīng)用外，逐漸也推廣到其他動物之疾病預(yù)防，成果良好。疫苗已是人類，畜產(chǎn)不可或缺的預(yù)防醫(yī)藥。豬，牛，羊，雞，鴨等畜禽產(chǎn)及寵物用疫苗也是疫苗產(chǎn)業(yè)之重點(diǎn)。暖水魚魚病相當(dāng)嚴(yán)重，但尚無疫苗、檢驗(yàn)試劑之疾病管理系統(tǒng)。 我們最近看到水產(chǎn)品因含氯霉素在歐、美、日本退貨的消息，是否歐美日故意使用高檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)來排斥外貨？也開始思考養(yǎng)殖是否可以不用抗生素？ 事實(shí)上，此一要求在畜產(chǎn)經(jīng)營已施行多年，加上挪威養(yǎng)殖鮭魚使用抗生素情形，在1986-7年每噸魚貨尚用1公斤抗生素，致使抗藥性細(xì)菌之滋生，抗生素使用無效，還遭遇高死亡率。至1990年代開始使用疫苗預(yù)防疾病，而只用抗生素於疫病之治療。早自1996年時已達(dá)到每噸魚貨使用不到0.3 毫克，等於不使用抗生素之高水準(zhǔn)。也看到鮭魚養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)不衰反進(jìn)，由建立完整的鮭魚疾病防治之體系，促成鮭魚存活率之大量提升提升，養(yǎng)殖成本降低，挪威也成鮭魚年產(chǎn)值達(dá)50萬噸領(lǐng)先國際之養(yǎng)殖大國。這近二十年挪威養(yǎng)殖的成功經(jīng)驗(yàn)確實(shí)証明疫苗才是預(yù)防疾病的良方，在水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)抗生素之使用應(yīng)僅止於治療。
作者: 水寶寶 時間: 2012-1-12 23:49
伍、魚用疫苗及發(fā)展疫苗的困難
疫苗是使用抗原(antigen)在目標(biāo)動物體中促製專一性被動免疫系統(tǒng)(specific adaptive immune system)、適時產(chǎn)生高量的專一性抗體(antibody)來預(yù)先提升動物之預(yù)防疾病之抗病力。
因之，一個成功有用的魚用疫苗不只是疫苗產(chǎn)品(抗原)而已，還包含劑型、佐劑、使用策略(方法及時間)四大要件，此些因素必需完整方能研發(fā)一件有效的預(yù)防疾病的疫苗。而且常因不同魚種養(yǎng)殖程序不同及疾病感染情況之不同，針對不同目標(biāo)魚種建立最佳之使用策略(方法及時間)也是疫苗使用成敗之因素。反之、若只有疫苗而無使用策略(方法及時間)，疫苗常常并得不到預(yù)期之效果。
在魚的疫苗研發(fā)上，另一重要觀念是魚與哺乳動物免疫系統(tǒng)魚之免疫機(jī)制，免疫系統(tǒng)及免疫反應(yīng)與哺乳動物不同之處，例如：
• 魚早在六億年前就存在，魚是首先有專一性被動免疫系統(tǒng)之動物，而一億四千年前才有哺乳動物。
• 目前大部份之魚只發(fā)現(xiàn)其一種免疫球蛋白IgM like，而人類有五種不同功能的免疫球蛋白。
• 魚之免疫記憶力短，常存在不到幾週。
• 魚之抗體製造力低。
• 甚至魚之抗體力價之高低，并不能直接代表抗病力之強(qiáng)弱，例如在鱈魚，免疫后有抗病力但抗體并不增加。
• 非專一性之免疫能力與專一性之免疫能力，在魚在抗病能力上皆有重要之角色。
有如上述原因，在發(fā)展魚用疫苗時，必需針對魚類免疫系統(tǒng)，先進(jìn)行了解，方能研發(fā)有效之疫苗。切忌盲目延用哺乳動物之免疫知識。
陸、適用海鱺養(yǎng)殖疾病預(yù)防體系之研發(fā)經(jīng)驗(yàn)
成功大學(xué)生物科技研究所之水產(chǎn)疾病及疾病預(yù)防研究團(tuán)隊多年來對海鱺免疫系統(tǒng)之研究，成果簡略說明如下:
海鱺之主要免疫器官與其他魚類似，為胸腺(thymus)、胰臟(spleen)及頭腎(head kidney)；其免疫機(jī)制之完全發(fā)育可能在孵化十天左右就有免疫反應(yīng)。這些資料 供應(yīng)了我們發(fā)展海鱺疫苗抗原、劑型、佐劑、使用時間、使用策略之基礎(chǔ)。
因魚對緊迫(Stress)非常敏感，Stress已証明會 降低魚之免疫力，免疫過程中應(yīng) 避免過份操作以增加稚魚之免疫發(fā)生力。
魚之免疫反應(yīng)與營養(yǎng)，體質(zhì)，種苗健康狀況，感染病歷及溫度等內(nèi)外在條 件 皆有關(guān)，故免疫前稚魚之狀況，溫度等皆需充份了解再免疫才能達(dá)到最 佳 保護(hù)效果。
海鱺專用的病原檢驗(yàn)試劑之配合才能組合成海鱺之疾病預(yù)防及治療系統(tǒng)。
作者: 水寶寶 時間: 2012-1-12 23:53
本帖最后由 水寶寶 于 2012-1-12 23:57 編輯
三、海鱺用細(xì)菌性多價型疫苗研發(fā)
疫苗之開發(fā)，以取得當(dāng)?shù)啬繕?biāo)魚種之疾病資訊及病原為首要，有了這些資訊才能發(fā)展疫苗及疫苗使用之方法及時程。以目前本土海鱺病原資料顯示尚未發(fā)現(xiàn)有病毒，而細(xì)菌則有弧菌(Vibrio spp. Vibrio parahaemolyticus), 巴斯德桿菌(Photobacterium damsela subspecies picicida), 產(chǎn)氣單胞菌(Aeromonas hydrophila), 鏈球菌(Streptococcus iniae)為主。其發(fā)生期大多在緊迫大之移動(搬運(yùn)、下箱網(wǎng))，溫度變化，及在500克之前發(fā)生。因此海鱺之免疫策略應(yīng)與石斑不同，而接近鮭魚。
在海鱺疫苗研發(fā)以下列四點(diǎn)說明：
1. 抗原
由澎湖、屏東之海鱺養(yǎng)殖場取得本土海域之細(xì)菌多株發(fā)展疫苗，并篩選最佳製法， 發(fā)展死菌疫苗疫苗。
2. 安全性實(shí)驗(yàn)及有效性實(shí)驗(yàn)
研發(fā)成之疫苗於海鱺，注射十倍之劑量觀察其安全性，尤其確定無死亡率、解剖 觀察生理、腹腔無粘液殘存、外表無異狀，食慾、游泳正常。長期無成長率衰落之副作用。
3、實(shí)驗(yàn)室人工攻毒試驗(yàn)
建立不同細(xì)菌於海鱺之攻毒系統(tǒng)，於實(shí)驗(yàn)水槽以高劑量(LD99)之細(xì)菌，模擬在養(yǎng) 殖場高劑量菌感染之情形，進(jìn)行免疫后之人工攻毒實(shí)驗(yàn)，分析疫苗產(chǎn)品之有效性，有效期之長短及品管。并藉此系統(tǒng)發(fā)展海鱺之最佳免疫方法、時間。
(1). 海鱺血清力價試驗(yàn)
發(fā)展海鱺血清ELISA檢驗(yàn)試劑，以供海鱺抗病力之品質(zhì)測定及免疫后抗病力之檢測。於實(shí)驗(yàn)組及對照組，於免疫后不同時間各取用15隻海鱺進(jìn)行 試驗(yàn)，進(jìn)行對於弧菌以及殺魚光桿菌之ELISA 力價測試。在疫苗注射之后疫苗組的血清力價有明顯上升的現(xiàn)線，而對照組則無顯示注射入體內(nèi)的疫苗，的確能誘發(fā)魚體內(nèi)產(chǎn)生抗菌的抗體。而對照組由於僅有注射佐劑，并無法誘發(fā)抗菌反應(yīng)。
(2). 實(shí)驗(yàn)組及對照組各使用15隻魚進(jìn)行試驗(yàn), 然后觀察其存活率變化。 為期四週。結(jié)果顯示在攻擊后約一週，對照組開始出現(xiàn)死亡現(xiàn)象，而免疫實(shí)驗(yàn) 組則應(yīng)有80%以上保護(hù)力。
4、海鱺養(yǎng)殖現(xiàn)場田間試驗(yàn)
各實(shí)驗(yàn)組及對照組各使用750隻海鱺魚進(jìn)行試驗(yàn)，每組并經(jīng)由掃描標(biāo)記，以使能於 同一箱網(wǎng)以同一養(yǎng)殖情況下進(jìn)行現(xiàn)場有效性實(shí)驗(yàn)。后計算成果。
實(shí)驗(yàn)組注射疫苗，對照組僅注射佐劑。經(jīng)由免疫及標(biāo)示后養(yǎng)殖至200-250 克放入 同一箱網(wǎng)中進(jìn)行養(yǎng)殖，一直到魚體重量達(dá)一公斤為止，期間約四個月。
在現(xiàn)場養(yǎng)殖的環(huán)境，對照組由250克到一公斤的存活率為44%，而疫苗組使用本 土型多價型疫苗存活率高達(dá)93.3%。并且只需免疫一次即可。顯示本土型多價型疫 苗在田間使用可以提供魚群良好的保護(hù)能力，以抵抗疾病的侵襲。
作者: 水寶寶 時間: 2012-1-12 23:58
柒、海鱺用注射型疫苗選擇之注意事項(xiàng)
目前水產(chǎn)養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)，尚未如畜禽產(chǎn)業(yè)擁有完整之疾病防治體系，及享有完備之疫苗與檢驗(yàn)試劑產(chǎn)品之階段，且國內(nèi)暖水魚種養(yǎng)殖戶對於疫苗產(chǎn)品的使用并不熟悉。加上國外鮭魚疫苗產(chǎn)業(yè)急著向國內(nèi)推銷，以獲得他們的疫苗產(chǎn)品於暖水魚種使用之經(jīng)驗(yàn)，以及臺灣多個單位亦宣稱有適用於海鱺的疫苗。養(yǎng)殖戶面對新的科技產(chǎn)品，如何利用這些產(chǎn)品來提升利潤，面對多項(xiàng)產(chǎn)品要如何選擇？相信一定會有困擾。
以養(yǎng)殖業(yè)者之立場，選擇唯一之原則是使用優(yōu)良的疫苗產(chǎn)品，以提高存活率，爭取最高利潤，使用的便利性，以及售后服務(wù)。
下述幾項(xiàng)選擇條件，供養(yǎng)殖戶參考使用：
一、有效性：
1. 是否使用本土病菌株發(fā)展之適用本土海鱺(有效)之疫苗。
2. 是否為死菌疫苗�；罹呙鐒t絕對不能使用。
3. 是否為對抗大部份疾病之多價型疫苗？(因大部分養(yǎng)過程皆會遭受多種疾病之感染，對抗一種疾病之單價型疫苗并不能達(dá)到最高存活率)
4. 是否有配套檢驗(yàn)試劑，可建立完整之疾病防治體系，以供魚苗之品質(zhì)選擇，免疫后魚隻抗病力之測試，及養(yǎng)殖期間抗病免疫力之抽樣監(jiān)控。
二、使用方便性：
5. 是否需補(bǔ)強(qiáng)針，有些產(chǎn)品一次免疫就可有效用。
三、安全性：
6. 是否在海鱺魚苗測試疫苗之安全性及有副作用：無死亡、腹腔生理，及養(yǎng)殖期間生長率之降低等。
7. 國際間以油質(zhì)疫苗效果持久最佳，但腹腔免疫會短期降低食慾。
四、售后服務(wù)：
6. 是否有具本土魚病經(jīng)驗(yàn)及執(zhí)照之獸醫(yī)師售后服務(wù)團(tuán)隊，協(xié)助養(yǎng)殖期間治療醫(yī)藥及現(xiàn)場之服務(wù)？
7. 是否有研究及快速檢測設(shè)施及專人、協(xié)助養(yǎng)殖期間治療醫(yī)藥及現(xiàn)場之病原及抗藥性檢測服務(wù)？
作者: kook 時間: 2012-1-13 09:17
給力，必須要支持�。�！
作者: 珠江所小廖 時間: 2012-1-13 10:24
本帖最后由 水寶寶 于 2012-1-16 08:38 編輯
漁用疫苗的使用，是預(yù)防魚病的最佳手段呀。石斑魚這兩年受病毒影響非常大，期待楊老師給我們指點(diǎn)迷津，請問國內(nèi)和誰聯(lián)系，可以買得到這類疫苗並得到技術(shù)指導(dǎo)，謝謝！
作者: 浪漫小子 時間: 2012-1-13 10:30
本帖最后由 水寶寶 于 2012-1-16 08:37 編輯
請問：
是石斑魚注射疫苗對吧？
有石斑魚口服疫苗嗎？
南方都海南地區(qū)養(yǎng)殖石斑魚多？廣東有那些地方養(yǎng)殖？
作者: 零黎 時間: 2012-1-13 17:12
本帖最后由 水寶寶 于 2012-1-16 08:38 編輯
非常期待啊
還有石斑魚皮膚問題也很嚴(yán)重 希望能得些知識 如病原 如何處理等 謝謝
作者: 水寶寶 時間: 2012-1-14 09:25
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發(fā)展生物科技協(xié)助石斑育苗產(chǎn)業(yè)之科技化
林翰佑、林青丘、陳逸民、陳宗岳、王涵青、楊惠郎
水產(chǎn)動物生技醫(yī)藥團(tuán)隊，國立成功大學(xué)生物科技研究所
摘要:
在高科技產(chǎn)業(yè)的現(xiàn)代，研發(fā)創(chuàng)新科技、應(yīng)用于創(chuàng)造知識經(jīng)濟(jì)，乃是現(xiàn)代高科技產(chǎn)業(yè)發(fā)展之鑰。創(chuàng)新關(guān)鍵技術(shù)之掌握，也是爭取國際市場的方法。有鑒于地球上人口日增，而地球上有龐大近72%之面積是海洋，而可用于糧食生產(chǎn)之土地及淡水資源逐日減少之現(xiàn)實(shí)情況下，利用海水生產(chǎn)食品的產(chǎn)業(yè)必然是人類未來的民生產(chǎn)業(yè)。同時、臺灣有十分扎實(shí)的水產(chǎn)養(yǎng)殖基礎(chǔ)，但也面臨發(fā)展瓶頸。因此、成功大學(xué)組合水產(chǎn)養(yǎng)殖生技醫(yī)藥研究團(tuán)隊匯集魚之流行病情、收集病原，以研發(fā)疫苗及疫苗在魚的使用法；分析魚苗發(fā)育條件，生產(chǎn)無病毒之健康魚苗；再整合魚苗之生產(chǎn)及疫苗之使用，生產(chǎn)魚養(yǎng)殖戶容易使用、且高抗病力(Pre-immunized Specific Pathogen Resistant，PI-SPR)魚苗。希藉此魚苗產(chǎn)品之推廣，減少疾病、提升存活率、以提高養(yǎng)殖業(yè)者利潤；降低抗生素濫用、減少藥物殘留、保障全民食品安全，并維護(hù)生產(chǎn)區(qū)之生態(tài)環(huán)境。此一長達(dá)八年之工作，始于組合研究團(tuán)隊，選擇專一重點(diǎn)方向，集中資源，進(jìn)行跨領(lǐng)域之研發(fā)。除研發(fā)創(chuàng)新科技及產(chǎn)品外，另組合系列產(chǎn)品成為產(chǎn)業(yè)能接受之生產(chǎn)系統(tǒng)；更導(dǎo)入企業(yè)管理模式，以試量產(chǎn)方式、建立量產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)作業(yè)手冊(SOP)。希望這些由學(xué)轉(zhuǎn)譯至產(chǎn)之先期準(zhǔn)備工作，能增加技轉(zhuǎn)之成功率及加速產(chǎn)業(yè)化之效率。
團(tuán)隊愿景希協(xié)助國內(nèi)傳統(tǒng)水產(chǎn)養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)精致化，達(dá)到對地球友善、可永續(xù)經(jīng)營之精致水產(chǎn)養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)的理想目標(biāo)。更進(jìn)一步作為水產(chǎn)養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)國際化之基礎(chǔ)。
二、產(chǎn)業(yè)發(fā)展關(guān)鍵困難：疾病是國際水產(chǎn)養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)發(fā)展之瓶頸
剖析產(chǎn)業(yè)發(fā)展現(xiàn)況，國內(nèi)外暖水魚種之水產(chǎn)養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)目前皆尚停留傳統(tǒng)型高密度飼養(yǎng)方式。此種養(yǎng)殖方式因過度密集，導(dǎo)致疫病叢生，經(jīng)營困難。導(dǎo)致之高死亡率也是國際高密度之養(yǎng)殖業(yè)在追求永續(xù)經(jīng)營上最大之瓶頸。例如密集養(yǎng)殖造成疾病，1987年臺灣是年產(chǎn)量八萬噸的草蝦王國，但1990年開始草蝦養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)因白點(diǎn)病病毒性疾病而快速衰退，一蹶不振；石斑魚種苗因腦神經(jīng)壞死病病毒感染育成成功率不到7%;臺灣為國際石斑魚魚苗供應(yīng)中心，但受NNV感染成功率不到10%，2008 ISA (infectious salmon anemia)在智利發(fā)生大型感染，造成正急速成長之鮭魚養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)損失近20億美元。為解決疾病問題在未有疫苗以預(yù)防疾病之現(xiàn)況下，抗生素還是唯一的治療方法。而抗生素濫用早已造成養(yǎng)殖區(qū)抗藥性細(xì)菌之叢生，對環(huán)境造成破壞。例如本團(tuán)隊在澎湖海面箱網(wǎng)養(yǎng)殖區(qū)取樣，發(fā)現(xiàn)對人類現(xiàn)用之14種抗生素皆已有抗藥性之細(xì)菌族群，并有些已高達(dá)60-80%，見圖2。
作者: 水寶寶 時間: 2012-1-14 09:26
三、機(jī)會：水產(chǎn)養(yǎng)殖科技與企業(yè)化是掌握水產(chǎn)養(yǎng)殖發(fā)展的樞紐
冷水魚種之大西洋鮭魚（Atlantic salmon）養(yǎng)殖是目前全世界最成功的科技化與企業(yè)化水產(chǎn)養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)的范例。而挪威之鮭魚產(chǎn)業(yè)從無到掌握國際鮭魚市場，成功的因素包含研發(fā)鮭魚養(yǎng)殖科技、使用疫苗降低生產(chǎn)成本與抗生素殘留，筑造可永續(xù)并穩(wěn)定生產(chǎn)之企業(yè)。在國際間、其鮭魚養(yǎng)殖科技及經(jīng)營模式已使挪威成為全球領(lǐng)先的鮭魚研發(fā)及關(guān)鍵產(chǎn)品供應(yīng)中心，延伸之經(jīng)濟(jì)效益也促使挪威能在國際持續(xù)開拓市場，創(chuàng)造龐大的經(jīng)濟(jì)產(chǎn)值。挪威科技化之鮭魚產(chǎn)業(yè)也成為國際各海洋國家皆希復(fù)制的范例。
暖水魚種遠(yuǎn)比冷水魚種多，加上溫帶氣候佳，養(yǎng)殖期較長之產(chǎn)業(yè)優(yōu)勢下，暖水魚種具比鮭魚更有市場規(guī)模及產(chǎn)品利基，應(yīng)可比挪威之鮭魚養(yǎng)殖更具國際競爭潛力。但暖水魚種之養(yǎng)殖目前尚停留于傳統(tǒng)之經(jīng)驗(yàn)式、家庭式的小農(nóng)產(chǎn)業(yè)，經(jīng)營方式靠經(jīng)驗(yàn)，遇到瓶頸則不易解決。不能避免的、暖水魚種之養(yǎng)殖國際競爭下、未來必然將依循挪威之高科技、工業(yè)化之鮭魚養(yǎng)殖企業(yè)發(fā)展模式，發(fā)展其中、也急需發(fā)展創(chuàng)新科技、系統(tǒng)化以建立企業(yè)化之精致產(chǎn)業(yè)。
在世界對水產(chǎn)養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)需求穩(wěn)定成長，而發(fā)展需要科技研發(fā)之現(xiàn)實(shí)情況下，臺灣投入此產(chǎn)業(yè)之優(yōu)劣點(diǎn)分析如表1。以臺灣國際競爭力分析，臺灣水產(chǎn)養(yǎng)殖技術(shù)向以能養(yǎng)殖近120種魚、貝類，又曾以草蝦及養(yǎng)鰻王國著名國際，頗富產(chǎn)業(yè)基礎(chǔ)，并與日本，挪威同列世界三大水產(chǎn)養(yǎng)殖技術(shù)領(lǐng)先國家。例如臺灣石斑魚苗養(yǎng)殖技術(shù)領(lǐng)先國際，曾一度為世界唯一之石斑魚苗生產(chǎn)及供應(yīng)國。石斑魚為生活于暖水區(qū)域珊瑚礁巖，近海肉食性魚種，由于其肉質(zhì)細(xì)嫩鮮美，不但深受東方及華人喜愛，而且也被歐洲人列為佳肴，屬于高價位水產(chǎn)品。石斑魚在臺灣目前海水養(yǎng)殖之主要魚種，其年生產(chǎn)數(shù)量約在300萬公斤(據(jù)農(nóng)委會及民間業(yè)者之資料，國內(nèi)成魚養(yǎng)殖約五千多萬尾，魚苗產(chǎn)量超過七千萬尾)，因利潤高(平均20-70%)，除臺灣外東南亞、中國大陸等地也積極投入石斑魚成魚之養(yǎng)殖。最近魚苗需求量也因中國大陸之需求而大增，加上天然幼魚來源幾乎捕撈殆盡、且嚴(yán)重破壞其棲息區(qū)之珊瑚礁，未來以人工培育之魚苗市場發(fā)展頗富發(fā)展空間，成功大學(xué)在抗病力高的石斑種苗科技上之研究持續(xù)突破，保持國際領(lǐng)先地位。
以挪威以Bio-security建立鮭魚養(yǎng)殖質(zhì)量鏈建立領(lǐng)導(dǎo)國際之經(jīng)驗(yàn)其方法之一就是先建立疾病防治的Bio-securit系統(tǒng)。以使用疫苗預(yù)防疾病，疾病少，存活率高、利潤提升就提升養(yǎng)殖戶接受新科技之興趣：減少抗生素用量就會減少藥物殘留降低提升魚貨質(zhì)量，增加消費(fèi)者購買之意愿；造成良性之經(jīng)濟(jì)循環(huán)。更重要的是抗生素及化學(xué)藥物使用之減力更能維護(hù)養(yǎng)殖環(huán)境，對環(huán)境友善，筑構(gòu)生產(chǎn)者、消費(fèi)者及環(huán)境友善三嬴之永續(xù)經(jīng)營產(chǎn)業(yè)生產(chǎn)目標(biāo)。
作者: 水寶寶 時間: 2012-1-14 09:28
參、創(chuàng)新研發(fā)成果：
自2000年成功大學(xué)組合水產(chǎn)養(yǎng)殖生技醫(yī)藥研發(fā)團(tuán)隊，稟承養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)管理預(yù)防重于治療的理念：如Bio-security養(yǎng)殖環(huán)境管理方式及以疫苗及免疫促進(jìn)劑之使用，取代抗生素于魚病防治。團(tuán)隊研究主軸為暖水魚種相關(guān)之生技醫(yī)藥的基礎(chǔ)及應(yīng)用研究，并選擇高經(jīng)濟(jì)價值的海水魚種，如石斑作為重點(diǎn)目標(biāo)魚種，分析流行病情，進(jìn)行生技醫(yī)藥產(chǎn)品與疾病防治方法的開發(fā)研究。目前研發(fā)成果如下:
一、選擇石斑作為重點(diǎn)魚種
1. 選擇石斑作為重點(diǎn)魚種
臺灣可完全養(yǎng)殖之魚貝類近120種，我們擇石斑(俗名Grouper、Garoupa、俗稱過魚、朱郭學(xué)名Epinephelus coioides, E. malabaricus, E. lanceratus)作為目標(biāo)魚種,因其國際市場大、養(yǎng)殖技術(shù)有待突破、目前競爭少等利基優(yōu)點(diǎn)。
在國際市場上、根據(jù)聯(lián)合國農(nóng)糧組織(FAO)2004年的統(tǒng)計，石斑魚總產(chǎn)量為255,738公噸，總產(chǎn)值為511億元新臺幣，其中養(yǎng)殖者僅占24%。臺灣石斑魚總產(chǎn)量為13,219公噸，總產(chǎn)值為26.5億元。為世界第二大石斑魚養(yǎng)殖國。臺灣是國際石斑魚苗主要生產(chǎn)國，曾占有80%國際市場，約需魚苗7,000萬只，產(chǎn)值約為7億元。以全球需求量達(dá)14億尾，總市場產(chǎn)值更可達(dá)到140億元。因此石斑國內(nèi)外皆有有極大之高質(zhì)量健康魚苗之市場需求
2. 分析產(chǎn)業(yè)困難：石斑魚苗生產(chǎn)是石斑養(yǎng)殖發(fā)展的主要瓶頸
魚苗是水產(chǎn)養(yǎng)殖最重要之關(guān)鍵零組件，魚苗之量及質(zhì)量攸關(guān)石斑產(chǎn)業(yè)之成敗。在魚苗之育成期主要之瓶頸有二：一是病毒感染，導(dǎo)致生產(chǎn)量之不穩(wěn)定，二為質(zhì)量不佳，常有畸型魚苗之發(fā)生。
石斑育苗期主要病情為腦神經(jīng)壞死病viral nervous necrosis disease (VNN) ，而自魚苗后主要病原為NNV, irido病毒，細(xì)菌性疾病則為弧菌屬Vibrio spp., Vibrio parahaemolyticus, 發(fā)光桿菌Photobacterium damsela subspecies picicida, 單泡菌Aeromonas hydrophila及鏈球菌。Streptococcus iniae。
二、研發(fā)生技關(guān)鍵產(chǎn)品：
1. 檢驗(yàn)試劑：在疾病防治之生技產(chǎn)品首要為精確(specificity)、靈敏(sensitivity)。除較熟悉的免疫檢測試劑外，分子檢測法如PCR方法因精確、靈敏漸受重視。我們也發(fā)展了臺灣常見之細(xì)菌(各種弧菌、單氣泡菌及發(fā) 光桿菌)、腦神經(jīng)壞死病毒(Nervous necrosis virus，NNV)及虹彩病毒（Iridovirus)之PCR疾病檢測方法及套組。并廣泛使用于種魚、魚卵之檢疫。例如以NNV-PCR方法，發(fā)現(xiàn)石斑魚卵大都帶NNV病毒，同時坊間常用初期餌料之牡蠣卵、輪蟲及橈腳類皆帶NNV病毒為感染源。(圖3) 此real time PCR疾病檢測方法及套組為建立養(yǎng)殖區(qū)疾病及環(huán)境監(jiān)控之bio-security system不可或缺的一環(huán)。
作者: 水寶寶 時間: 2012-1-14 09:30
2. 疫苗與免疫促進(jìn)劑
在預(yù)防重于治療的目標(biāo)上，具預(yù)防疫病功能的疫苗更是bio-security的系統(tǒng)里最重要的關(guān)鍵零組件。疫苗之成效在哺乳動物如人類畜產(chǎn)及禽類使用不遑枚舉。但魚類之疫苗除在冷水魚種之鮭鱒鯛魚外，暖水魚種之疫苗、使用方法及成效則尚在萌芽階段。因臺灣海域暖水魚種如石斑在稚魚及育成期有顯著不同的流行病原，因而、我們發(fā)展了注射型疫苗供育成期使用及口服型疫苗供育苗期使用。
(1). 注射型不活化細(xì)菌疫苗
針對臺灣南部養(yǎng)殖海域五種重要病菌(Vibrio spp.,Vibrio parahaemolyticus, Photobacterium damsela subspecies picicida, Aeromonas hydrophila, Streptococcus iniae)發(fā)展了多價型不活化細(xì)菌疫苗，并經(jīng)三年三個不同魚場，不同季節(jié)進(jìn)行現(xiàn)場田間有效性實(shí)驗(yàn)。總共使用了近6000尾，其成果見表一。在暖水魚種免疫之成果供應(yīng)了一些魚用疫苗使用的新經(jīng)驗(yàn)。例如
發(fā)現(xiàn)多價型疫苗可以只經(jīng)一次注射就預(yù)防五種重要病菌，
不同魚種似乎有不同免疫反應(yīng)時間
本土菌株有較佳免疫力
時間暖水魚種因溫度影響免疫反應(yīng)有較快的免疫反應(yīng)時間，免疫后約需400°C-days 海鱺就有免疫力 (鮭鱒魚約需1400°C-days )
在臺灣及東南亞地區(qū)補(bǔ)強(qiáng)免疫(Booster immunization)反而降低保護(hù)力，補(bǔ)強(qiáng)免疫在暖水魚種似乎非必要
先天免疫系統(tǒng)(Innate immunity)與 后天免疫系統(tǒng)都需同促進(jìn) 以達(dá)到最佳抗病效果
如表2所示，很顯然的是因疫苗可降低養(yǎng)殖期間不定期之死亡率，因此除減少魚苗需求量外也可降低飼料之費(fèi)用，因此可穩(wěn)定生產(chǎn)及經(jīng)營利潤。
作者: 水寶寶 時間: 2012-1-14 09:32
(2) 可在稚魚大量群體免疫之口服疫苗關(guān)鍵平臺技術(shù)
石斑育苗期之主要疾病為腦神經(jīng)壞死病viral nervous necrosis disease (VNN)，病原為腦神經(jīng)壞死病病毒nervous necrosis virus (NNV)。NNV感染石斑、鱸魚、比目魚、海鱺等重要經(jīng)濟(jì)魚種自胚胎期之魚苗就會受感染，加上坊間魚苗缺乏疾病預(yù)防之觀念，當(dāng)育苗失敗就將污染之池水不經(jīng)處理，徑自排放，更加速病毒之傳播。VNN之病癥因病毒快速侵犯腦神經(jīng)及視網(wǎng)膜細(xì)胞，而造成典型之旋轉(zhuǎn)式游泳近。NNV一旦感染很難幸免致死率達(dá)100%，被認(rèn)為是為國際養(yǎng)殖高價魚種最棘手的病毒。更嚴(yán)重的是在胚胎期之魚苗就會受感染(在孵化14天就常發(fā)現(xiàn)病情)，在不同石斑中稚魚至成魚也有不同病毒發(fā)病期，如龍膽石斑在一年內(nèi)尚常見感染，而青斑在三寸以上病惰明顯減少。而稚魚期一旦感染常達(dá)100%致死率，被認(rèn)為是國際高價魚種養(yǎng)殖最嚴(yán)重的疾病之一。在研發(fā)NNV疫苗的過程中，最大困擾是NNV病情發(fā)生于稚魚不到0.5cm之階段，不能以注射或集中浸泡的方法免疫，故發(fā)展口服疫苗，而口服疫苗必需克服下列瓶頸：(a) 不吃或吃不夠；(b) 抗原被腸胃消化系統(tǒng)破壞；(c) 因魚苗尚在胚胎發(fā)育期，若疫苗成份不佳，會造成畸型魚苗。
本實(shí)驗(yàn)室開發(fā)藉稚魚之天然食物鏈，以大魚吃小魚、小魚吃蝦米(豐年蝦)、蝦米吃單細(xì)胞生物(細(xì)菌)的自然現(xiàn)象，直接以表現(xiàn)NNV抗原蛋白的不活化(killed)大腸菌喂食豐年蝦，包埋含NNV抗原蛋白之大腸菌，再喂食稚魚。此疫苗不但連續(xù)二次以LD60之之攻毒實(shí)驗(yàn)中，各達(dá)80% 及 86%存活率，而無免疫之魚存活率分別為 44% 及 54%，相對保護(hù)率(RPS; relative protection frequency) 達(dá)到 64.2% 及69.5%。且在現(xiàn)場田間實(shí)作上也成功使用，自2005年至今于本校安南育苗場田間測試實(shí)作，連續(xù)成功次數(shù)達(dá)24 次以上，皆可防止病毒感染，成功率達(dá)100%，相較目前坊間育苗場成功率不到1%高出甚多。
此口服疫苗在NNV-Free之石斑魚苗繁養(yǎng)殖場田間實(shí)作測試也達(dá)到預(yù)防是效果，自Nov 2005已使用于成功大學(xué)安南育苗場連續(xù)成功 20 次以上，且無病毒感染成功率達(dá)100%而目前坊間育苗場成功率不到1%。因疫苗需一段時間才能充份發(fā)揮免疫保護(hù)力，但也發(fā)現(xiàn)在一NNV污染場單獨(dú)使用疫苗，并不能達(dá)到無感染之效果。
作者: 水寶寶 時間: 2012-1-14 09:33
本帖最后由 水寶寶 于 2012-1-14 09:35 編輯
(3). 口服疫苗關(guān)鍵平臺技術(shù)之優(yōu)點(diǎn)
此服疫苗關(guān)鍵平臺技術(shù)結(jié)合基因工程及利用初期餌料包埋抗原之多元性，兼具下列優(yōu)點(diǎn)：
2 利用基因工程只要該抗原基因已知，就可研發(fā)subunit vaccine,可利用于任何病原菌(如細(xì)菌、病毒、寄生蟲等)
3 提供抗原雙層保護(hù)(大腸桿菌與浮游生物)，減少腸胃道破壞
4 可發(fā)展為多價型疫苗。
5 可加入具免疫促進(jìn)子(immune or/and immuno-modulator)的基因可加入本系統(tǒng)中，以促進(jìn)魚的免疫反應(yīng)
6 可利用此蛋白傳遞方法，發(fā)展其他功能蛋白
7 無需添加任何非生物性物質(zhì)(如liposome, adjuvant) 無殘留、無副作用
8 安全性高，魚苗在無壓力下使用。
9 研發(fā)，制造及品管容易。
10 可迅速、同時免疫同池中之所有魚只。
(4). 可重復(fù)成功的石斑室內(nèi)式育苗系統(tǒng)
水生之魚與陸地哺乳動物之?同，魚之成長由孵化卵至稚魚，這些胚胎發(fā)育皆在水中并無母體之支持及保護(hù)，完全依靠水環(huán)境供應(yīng)其營養(yǎng)需求，育苗最困難:魚苗質(zhì)量是養(yǎng)殖成敗之關(guān)鍵條件育苗就是在自然的水中將一受精卵(一細(xì)胞)培養(yǎng)成一只稚魚。加上水環(huán)境中充滿了病原菌(10-103/ml)，稚魚在生長環(huán)境中也長期面對疾病感染之危機(jī)。目前石斑育苗大都尚使用室外土池或水泥池育苗方式，利用造水繁養(yǎng)水中之藻相及浮游生物再于育苗不同階段，輔助外購之牡蠣受精卵、輪蟲及橈腳類生物。此種育苗方式靠自然形成之食物鏈，人工少、成本低，但在病毒感染已是常態(tài)下、成功率低，供應(yīng)量不穩(wěn)定，加上浮游生物質(zhì)量很難掌握之情況下，質(zhì)量參差不齊。目前尚是”靠天吃飯”的不穩(wěn)定生產(chǎn)模式。在魚苗量及質(zhì)量攸關(guān)水產(chǎn)養(yǎng)殖成敗之情況下，魚苗生產(chǎn)技術(shù)急需建立。
營養(yǎng):初期餌料之質(zhì)及量
關(guān)鍵條件
1 疾病
2 初期餌料之量與質(zhì)
3 育苗之物理及生態(tài)條件
苗的關(guān)鍵條件:研究的方向
�。翰∏�、病毒、病菌
在發(fā)現(xiàn)臺灣到處都有病毒之情況下利用室內(nèi)無病毒SPF石斑魚養(yǎng)殖系統(tǒng)，生產(chǎn)高抗病力健康魚苗，成功提升養(yǎng)殖存活率。
O2, CO2, ammonium, nitrate, pH, bacterium, photo period, light intensity etc.,
Condition of Larvae rearing
伍、推廣策略高抗病力之 (PI-SPR)魚苗生產(chǎn)系統(tǒng)
PI-SPR魚苗之優(yōu)點(diǎn)
1 養(yǎng)殖戶使用方便,容易銷售,易建立品牌形象
2 產(chǎn)品可提高飼養(yǎng)存活率，降低成本，增加利潤
3 減少抗生素使用, 不易被模仿及競爭取代
作者: 水寶寶 時間: 2012-1-14 09:44
發(fā)展石斑健康魚苗科技 協(xié)助產(chǎn)業(yè)永續(xù)經(jīng)營
楊惠郎
國立成功大學(xué)農(nóng)業(yè)生物科技中心
摘要
地球上人口日增，而地球上有龐大近72%之面積是海洋，在可用于糧食生產(chǎn)之土地及淡水資源逐日減少之現(xiàn)實(shí)情況下，利用海水生產(chǎn)食品的產(chǎn)業(yè)必然是人類未來的民生產(chǎn)業(yè)。同時、臺灣有十分扎實(shí)的水產(chǎn)養(yǎng)殖基礎(chǔ)，但也面臨疾病叢生之發(fā)展瓶頸。因此、成功大學(xué)組合水產(chǎn)養(yǎng)殖生技醫(yī)藥研究團(tuán)隊，集中全力以石斑為主要目標(biāo)，匯集流行病情、收集病原，研發(fā)多價型注射疫苗及疫苗在魚的使用法，以供成魚養(yǎng)殖階段的疾病控制及提升存活率；發(fā)明NNV病毒口服疫苗，解決了魚苗育成階段嚴(yán)重死亡的關(guān)鍵瓶頸，穩(wěn)定青斑魚苗之育成。繼之、在魚苗穩(wěn)定供應(yīng)之情況下，分析并適化青斑魚苗育苗條件，提高魚苗生產(chǎn)效率；再整合魚苗之生產(chǎn)及疫苗之使用，生產(chǎn)魚養(yǎng)殖戶容決易使用、具高抗病力(Pre-immunized Specific Pathogen Resistant，PI-SPR)魚苗。希藉PI-SPR魚苗產(chǎn)品之新推廣策略下，供應(yīng)養(yǎng)殖戶直接使用，藉此迅速減少疾病、提升存活率、提高養(yǎng)殖業(yè)者利潤；降低抗生素濫用、減少藥物殘留、保障全民食品安全；并維護(hù)生產(chǎn)區(qū)之生態(tài)環(huán)境。
此一長達(dá)十年之工作，始于選擇專一重點(diǎn)方向，組合研究團(tuán)隊，集中資源，進(jìn)行跨領(lǐng)域之研發(fā)。在傳統(tǒng)水產(chǎn)養(yǎng)殖蛻變成科技化的精致農(nóng)業(yè)的目標(biāo)下，研發(fā)創(chuàng)新科技及產(chǎn)品。最關(guān)鍵乃是水產(chǎn)養(yǎng)殖科技化生產(chǎn)系統(tǒng)之整合。在建立”一條龍”的安全高質(zhì)量的生產(chǎn)鏈(High quality production chain)的觀念下，研發(fā)關(guān)鍵零組件，組合系列產(chǎn)品及多項(xiàng)技術(shù)成果成為知識經(jīng)濟(jì)(Technlopgy based economy)。計劃執(zhí)行以完全解決傳統(tǒng)水產(chǎn)養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)之發(fā)展困難為目的，產(chǎn)品設(shè)計則以市場接受度為原則，更導(dǎo)入企業(yè)管理模式，以試量產(chǎn)方式、建立量產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)作業(yè)手冊(SOP)。這些以市場需求導(dǎo)向(Market driven and mission oriented planning)來規(guī)劃的計劃，加速了由”學(xué)”轉(zhuǎn)譯至”產(chǎn)”之技轉(zhuǎn)之成功率及產(chǎn)業(yè)化之效率。
作者: 水寶寶 時間: 2012-1-14 09:48
一、 前言
1. 臺灣一向足以為傲、領(lǐng)先國際的水產(chǎn)養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)，一再發(fā)生疫病，產(chǎn)業(yè)面臨衰萎危機(jī)
臺灣及亞洲的水產(chǎn)養(yǎng)殖尚停留于傳統(tǒng)家庭式(backyard) 小農(nóng)模式，素喜密集養(yǎng)殖，水中魚多、排泄物多、細(xì)菌就多，魚只受到緊迫(stress)，抗病力降低，造成嚴(yán)重病情及高死亡率。
疾病在臺灣已使多種重大水產(chǎn)養(yǎng)殖主要品種逐項(xiàng)淪陷。例如
1987年，臺灣號稱草蝦王國年產(chǎn)量高達(dá)80,000噸，短短不到三年、自1990年開始草蝦感染白點(diǎn)病病毒(WSSV)而養(yǎng)殖失敗，產(chǎn)業(yè)一去不復(fù)返。
同樣的白點(diǎn)病病毒病情在國際間也一再發(fā)生。例如白點(diǎn)病病毒在亞洲于1992年造成近美元4-6 billion之損失，不久在1999年白點(diǎn)病病毒猖獗中南美洲、也造成近1 billion美元送損失。
養(yǎng)殖戶于是開始改養(yǎng)具白點(diǎn)病病毒高抗病力的新蝦種-白蝦，同樣地白蝦的桃拉(Taura)病毒，也很快地在1991-19921出現(xiàn)，造成近2 billion美元的損失�，F(xiàn)在WSSV及Taura病毒是國際養(yǎng)蝦產(chǎn)業(yè)天天得面對的惡夢。
在1990年代，一些臺灣養(yǎng)蝦戶也開始養(yǎng)貝類九孔或魚類石斑及海鱺。九孔近年來也深受不明病原侵犯，產(chǎn)業(yè)在臺灣已消失。
改養(yǎng)魚類之養(yǎng)殖方向、備受看好的石斑，臺灣曾是為國際石斑魚苗供應(yīng)中心，曾占有國際80%的石斑魚苗市場。近年來也受腦神經(jīng)壞死病病毒(NNV, Nervous Necrosis Virus)感染，大部份石斑種魚及受精卵都帶病源，導(dǎo)致魚苗育成的成功再現(xiàn)率不到10%；
在成魚育成上、海鱺及石斑由魚苗成魚育成率只約為20-40%。當(dāng)然疾病問題也是國際水產(chǎn)養(yǎng)殖之共同問題，例如在2008年智利鮭魚養(yǎng)殖發(fā)生大規(guī)模ISA (infectious salmon anemia) 感染，造成正急速成長之鮭魚養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)損失近20億美元。
不同魚、蝦、貝類養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)同樣地受一直不停地受病害感染，養(yǎng)殖戶不停研發(fā)改養(yǎng)新品種，也一再失敗、重蹈覆轍。在養(yǎng)殖模式若不改進(jìn)的情況，各種水產(chǎn)之養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)一蹶不振的歷史必將一再重演，這些疾病造成的產(chǎn)業(yè)困境，已使養(yǎng)殖業(yè)者一籌莫展。
密集養(yǎng)殖不只造成疾病，使養(yǎng)殖戶飽受損失；而為治療疾病、必需大量使用抗生素，導(dǎo)致魚貨的藥物殘留，消費(fèi)者對魚貨質(zhì)量的要求日嚴(yán)，藥物殘留使消費(fèi)者怯步不前；養(yǎng)殖環(huán)境中抗藥性細(xì)菌之發(fā)生，抗生素逐漸失效，因而不得不加重劑量，再造成抗生素藥物濫用，抗藥性細(xì)菌之積存，更延伸造成養(yǎng)殖環(huán)境之破壞及產(chǎn)業(yè)衰微等后果。這由密集養(yǎng)殖到疾病，導(dǎo)致環(huán)境惡化及魚貨質(zhì)量下降，環(huán)環(huán)相扣的因果循環(huán)，也就是傳統(tǒng)式養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)發(fā)展的瓶頸。
水產(chǎn)養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)發(fā)展歷史就有如陳李農(nóng)改研究團(tuán)隊執(zhí)行長杜宇及海洋大學(xué)水產(chǎn)養(yǎng)殖系教授郭金泉敘述「臺灣水產(chǎn)養(yǎng)殖發(fā)展，始終落入不斷追求明星物種的迷思」，把「落跑當(dāng)轉(zhuǎn)進(jìn)」，遇到問題不澈底解決，而改養(yǎng)新魚種，是現(xiàn)在養(yǎng)殖漁業(yè)政策最大盲點(diǎn)。在疾病無國際的現(xiàn)況下，目前傳統(tǒng)水產(chǎn)養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)之發(fā)展困境已是臺灣也是國際水產(chǎn)養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)急待解決之瓶頸。
回顧人類及動物之醫(yī)學(xué)史，在疾病之控制、預(yù)防重于治療，在醫(yī)藥之使用的成功經(jīng)驗(yàn)上、預(yù)防疫苗功能更勝于治療抗生素之使用。在水產(chǎn)動物之疾病控制上、當(dāng)前歐美水產(chǎn)養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)之冷水魚種鮭魚養(yǎng)殖已全面成功地使用疫苗提升飼養(yǎng)成功率。臺灣及其他開發(fā)中國家現(xiàn)有的家庭式(backyard)經(jīng)營的暖水魚種之養(yǎng)殖則尚未使用疫苗來解決疾病傳染。海水水產(chǎn)養(yǎng)殖已被國際重視，工業(yè)化之水產(chǎn)養(yǎng)殖也是國際各海洋國家積極建立水產(chǎn)養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)的理想目標(biāo)。
2、石斑養(yǎng)殖業(yè)面臨疾病危機(jī)，石斑王國前途堪憂
石斑(俗稱朱過魚、郭魚)魚肉質(zhì)鮮美，是華人最喜歡的高價桌魚。石斑魚棲息于珊瑚礁的底棲魚類，不易以魚網(wǎng)捕捉，通常需以釣竿、魚槍、炸藥或毒藥麻醉捕取。這種捕魚法也造成珊瑚礁生態(tài)的破壞。過度捕撈也使多種石斑瀕臨絕種，如赤點(diǎn)石斑魚，鞍帶石斑魚(龍膽石斑)皆已分列為”頻�！被颉币孜！逼贩N。亡羊補(bǔ)牢應(yīng)以養(yǎng)殖取代捕撈。最近石斑也在ECFA上被列入早收清單，市場極富潛力，養(yǎng)殖戶頗為興奮。因此在經(jīng)濟(jì)上、食用上、生態(tài)維護(hù)上，石斑為一臺灣值得投入養(yǎng)殖的魚種。
石斑魚苗繁養(yǎng)殖最主要的病原為NNV病毒，成魚育成階段則為細(xì)菌性疾病為主。NNV是一種非常簡單的RNA病毒，只感染魚類，尤其在魚苗階段最為嚴(yán)重。NNV也感染鱸魚、比目魚、海鱺等重要魚種，更嚴(yán)重的是臺灣最普偏的青斑及龍膽石斑在胚胎期之魚苗就會受感染，在孵化后14至50天最常見疾病發(fā)生，在龍膽石斑50天后之稚魚至成魚階段則也見病毒感染。而稚魚期一旦感染常達(dá)100%致死率，被認(rèn)為是國際高價魚種養(yǎng)殖最嚴(yán)重的疾病之一。因?yàn)橐话闶唣B(yǎng)殖戶缺乏疾病控制的觀念，一有病毒感染、育苗失敗，就直接排放未經(jīng)處理的養(yǎng)殖用水，因此也將大量的病毒傳播，感染更多魚只并污染環(huán)境。我們多年來以最敏感之檢測方法(RT-PCR)調(diào)查臺灣石斑生產(chǎn)區(qū)NNV病毒流行狀況，發(fā)現(xiàn)南部石斑養(yǎng)殖之環(huán)境已完全被病毒污染，因此、在臺灣石斑養(yǎng)殖區(qū)可說已是偏地病毒，傳統(tǒng)Mesocosm方式生產(chǎn)石斑魚苗之過程中有多重不同途徑病毒可趁隙而入。例如檢測之近百尾種魚中帶病原，生產(chǎn)之受精卵近90%也發(fā)現(xiàn)帶病毒，可由垂直方式感染魚苗；更嚴(yán)重的是石斑魚苗必需之初期餌料-坊間之橈腳類浮游生物也可能因養(yǎng)殖土池之污染大多也帶病毒，在育苗的不同階段感染魚苗。而坊間之一般魚苗場尚無嚴(yán)格的安全隔離觀念(Bio-security)及設(shè)施，也會因育苗池內(nèi)部及工作人員及訪客外人攜入；在眾毒”圍城”之下當(dāng)然無一幸免、一一淪陷。
作者: 水寶寶 時間: 2012-1-14 09:49
二、 成功大學(xué)組合研究團(tuán)隊投入石斑生物科技之研究
在高科技的現(xiàn)代，危機(jī)就是轉(zhuǎn)機(jī)，轉(zhuǎn)機(jī)創(chuàng)造商機(jī)�，F(xiàn)代養(yǎng)殖生產(chǎn)戶必需同時維護(hù)生產(chǎn)環(huán)境及保持產(chǎn)品質(zhì)量。因此民生養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)已逐漸走向資及量必需兼顧的綠色生產(chǎn)模式。綠色有機(jī)養(yǎng)殖業(yè)，需利用科技，預(yù)防疾病，精致管理，建立生產(chǎn)履歷，發(fā)展對環(huán)境友善，生產(chǎn)優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品，負(fù)責(zé)的生產(chǎn)方式。才能建立可永續(xù)經(jīng)營的養(yǎng)殖科技。
成功大學(xué)地處臺灣南部石斑養(yǎng)殖區(qū)，為協(xié)助產(chǎn)業(yè)，我自2001年由中央研究院轉(zhuǎn)任國立成功大學(xué)，就組合水產(chǎn)生技醫(yī)藥研發(fā)團(tuán)隊。團(tuán)隊迄今已有5位助理教授以上研究人員，加上研究助理及研究生共約四十多位研發(fā)人員，為一具國際規(guī)模之水產(chǎn)養(yǎng)殖生技研究團(tuán)隊。研究專長涵蓋魚病，疫苗研發(fā)及測試，魚免疫學(xué)，魚與病毒交互機(jī)制，胚胎發(fā)育之營養(yǎng)需求及藻源醫(yī)藥成份，蝦免疫學(xué)，養(yǎng)殖緊迫分子機(jī)制。實(shí)驗(yàn)設(shè)施在校方支持下，在成功校區(qū)已有近200坪之分子生物、病理、微生物、免疫、病毒之實(shí)驗(yàn)室，在安南校區(qū)現(xiàn)有100L及500L細(xì)菌酦酵糟供疫苗及免疫促進(jìn)劑之生產(chǎn)，并建構(gòu)近250坪之水產(chǎn)實(shí)驗(yàn)設(shè)施，供疫苗測試使用。其中最特殊的是一國際首座的室內(nèi)式無病毒(SPF)石斑魚苗孵化育成場，及室內(nèi)式無病毒(SPF)初期餌料生產(chǎn)設(shè)施，已可長期穩(wěn)定地生產(chǎn)無病毒石斑魚苗供實(shí)驗(yàn)用。團(tuán)隊的愿景以研發(fā)生物科技協(xié)助石斑養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)科技化(精致農(nóng)業(yè)) ，由關(guān)鍵產(chǎn)品之研發(fā)，到系統(tǒng)整合。在生產(chǎn)質(zhì)量鏈(Quality chain)的工業(yè)化養(yǎng)殖的觀念下，發(fā)展能澈底解決傳統(tǒng)式水產(chǎn)養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)危機(jī)，建立成科技化養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)的創(chuàng)新科技，并選擇石斑為目標(biāo)產(chǎn)業(yè)。
團(tuán)隊研究主軸為暖水魚種相關(guān)之生技醫(yī)藥的基礎(chǔ)及應(yīng)用研究。并選擇高經(jīng)濟(jì)價值的海水魚種，如海鱺與石斑作為目標(biāo)，以研發(fā)魚用疫苗科技、檢驗(yàn)方法及疫苗產(chǎn)品，分析魚苗育成條件，建立安全無病毒之魚苗生產(chǎn)方法。解決產(chǎn)業(yè)發(fā)展瓶頸，帶動國內(nèi)水產(chǎn)養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)之科技化及產(chǎn)業(yè)升級，并以建立成國際領(lǐng)先之石斑養(yǎng)殖研究及人才訓(xùn)練中心作為愿景。
作者: 水寶寶 時間: 2012-1-14 09:51
三、 創(chuàng)新科技研發(fā)成果：石斑魚疾病及預(yù)防生技醫(yī)藥的科技研究成果
魚類與一般我們熟悉的哺乳動物不同，就是其受精卵到魚苗(胚胎)是在水中(體外)發(fā)育，因此魚的胚胎的營養(yǎng)需求就得由水環(huán)境中攝取，同樣地、在處于水中的魚苗在發(fā)育階段就會受到外來病毒或病菌的感染。而在石斑的養(yǎng)殖上，最大的關(guān)鍵瓶頸是在其胚胎發(fā)育的營養(yǎng)供應(yīng)及疾病防治。
目前現(xiàn)行的育苗方法分為全室外式(mesocosms)及半室內(nèi)式育苗場。二者主要差別在魚苗育成，前者魚苗及初期餌料皆在同一室外池，后者則是將魚苗育成移至室內(nèi)以避免天候條件影響魚苗之發(fā)育，但初期餌料培養(yǎng)尚在室外。分析石斑魚苗育成之失敗原因，石斑魚苗之關(guān)鍵條件有下列三項(xiàng)要件:
需控制病毒感染，方能穩(wěn)定生產(chǎn)
得分析育苗條件，才能提升生產(chǎn)效率
調(diào)配初期餌料營養(yǎng)成份，解決畸型率，生產(chǎn)高質(zhì)量魚苗
我們由此方向，按序研發(fā)，逐一解決困難。成果略述如下：
成果1、疾病控制：可在稚魚大量群體(massive)同時免疫之口服疫苗技術(shù)
雖然注射型疫苗已在人類及陸地養(yǎng)殖動物中大量使用，也成功地控制疾病，但在魚類中只有冷水魚種之鮭、鱒類使用之疫苗，而眾多之暖水魚種尚無疫苗可用。因此我們實(shí)驗(yàn)室投入暖水魚種之疫苗研發(fā)。
在研發(fā)NNV疫苗的過程中，因NNV病情發(fā)生于稚魚不到0.5cm之階段，不能以注射或集中浸泡的方法免疫，故發(fā)展口服疫苗，而口服疫苗必需克服下列瓶頸：(a) 不吃或吃不夠；(b) 抗原被腸胃消化系統(tǒng)破壞；(c) 因魚苗尚在胚胎發(fā)育期，若疫苗成份不佳，會造成畸型魚苗。
實(shí)驗(yàn)室開發(fā)藉稚魚之天然食物鏈，以大魚吃小魚、小魚吃蝦米(豐年蝦)、蝦米吃單細(xì)胞生物(細(xì)菌)的自然食物鏈，直接以不活化(inactivated)含NNV抗原蛋白的大腸菌喂食豐年蝦，包埋含NNV抗原作為疫苗，再以此豐年蝦喂食稚魚。此疫苗不但在實(shí)驗(yàn)證明可有效地預(yù)防病毒感染，而且在現(xiàn)場田間實(shí)作上也連續(xù)成功次數(shù)達(dá)40 次以上，皆可防止病毒感染，成功率達(dá)100%，相較目前坊間育苗場成功率不到10%高出甚多。
此魚用疫苗關(guān)鍵平臺技術(shù)(universal platform technology)有如下特色及優(yōu)點(diǎn)：
結(jié)合基因工程可選殖及表現(xiàn)任何病毒或病菌之抗原基因，可開發(fā)多種口服疫苗。
以單細(xì)胞生物(如大腸菌)內(nèi)大量表現(xiàn)抗原蛋白，增加疫苗之單位劑量(大腸菌達(dá)1000倍) 。
提供雙層生物包埋層(bio-layer，大腸桿菌與浮游生物)保護(hù)抗原，可減少魚腸胃消化酵素之破壞。
可發(fā)展為多價型疫苗。
利用浮游生物自動濾食單細(xì)胞生物之現(xiàn)象，疫苗制造容易，品資均一，品管簡單。
因疫苗包理于稚魚之食物中，一旦投喂可迅速并同時免疫整池全部稚魚，減少每尾注射之人工、時間及對稚魚造成之緊迫。
因輪蟲及豐年蝦多數(shù)魚類之稚魚皆會攝食，因而此口服疫苗可使用于大部份之魚類。
可在稚魚階段使用，提早免疫。
迅速、同時免疫同池中之所有魚只。
疫苗成份全為可消化成食物之成份，安全、無殘留、無副作用。
此口服疫苗技術(shù)成功，不但解決了國際石斑育苗病毒感染的產(chǎn)業(yè)問題，而且是國際首次證明可在稚魚階段魚用免疫關(guān)鍵方法的創(chuàng)新發(fā)明。
成果2、疾病控制：育成期使用之系列疫苗
我們也匯集臺灣養(yǎng)殖區(qū)域常見之多種細(xì)菌病原，研發(fā)多價注射型疫苗，并證明只需注射一次即可在一年的育成期達(dá)到預(yù)防疾病之效果。
成果3、環(huán)境：以隔離式的生物安全(Bio-security)原則、構(gòu)建亞洲首座無病毒之石斑魚苗生產(chǎn)系統(tǒng)
我們發(fā)現(xiàn)口服疫苗并不能在坊間現(xiàn)有育苗場完全阻隔病毒之感染。其原因是在孵化至二寸苗近六十天的育苗期病毒能自多種途徑感染病毒。因此一無病毒之室內(nèi)養(yǎng)殖場及無病毒初期餌料之生產(chǎn)也是為石斑育苗之必要條件。我們由了解目前坊間之土池及半室內(nèi)式魚苗場失敗之經(jīng)驗(yàn)，分析病毒之感染途徑在環(huán)境中，自行設(shè)計一座完全隔離式的石斑育苗場。
作者: 水寶寶 時間: 2012-1-14 09:55
成果4、魚苗發(fā)育：分析育苗條件，提升生產(chǎn)效率
在此干凈、無病毒(NNV-SPF)的硬體設(shè)施下，供應(yīng)我們研究實(shí)驗(yàn)環(huán)境。在耗費(fèi)近六年時間分析石斑魚苗發(fā)育之物理、化學(xué)及營養(yǎng)之各項(xiàng)條件，發(fā)展了一可隔離外界病毒污染的生產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)流程(SOP)。在硬、軟體配合下，加上完善嚴(yán)格的管理，四年來已近四十次連續(xù)成功生產(chǎn)每批可達(dá)萬尾級的先導(dǎo)生產(chǎn)規(guī)模(pilot scale)。充份地證明在已有病毒的環(huán)境中、若使用此新型完全室內(nèi)式的石斑魚苗生產(chǎn)系統(tǒng)，可以成功地生產(chǎn)健康的石斑魚苗。
成大室內(nèi)式的石斑育苗生產(chǎn)系統(tǒng)已可完全避免病毒感染，100%的成功再現(xiàn)率，穩(wěn)定單位生產(chǎn)量，生產(chǎn)高抗病力之石斑魚苗。達(dá)到工業(yè)化之”計劃生產(chǎn)”方式。其成效見表一。
成果5、營養(yǎng)：調(diào)整初期餌料配方、降低魚苗畸型率
畸型魚苗常是魚苗生產(chǎn)上常見的缺陷。我們分析現(xiàn)用初期餌料之成份及魚苗發(fā)育各階段的營養(yǎng)需求，發(fā)展不同初期餌料之營養(yǎng)配方，已可將青斑魚苗畸型率降低(表二)。大量提升魚苗之良率。
成果6、 魚類疫苗推廣策略：高抗病力之 (PI-SPR)魚苗
在能成功養(yǎng)殖石斑魚苗后，為事先預(yù)防田間一般成魚育成期將遭遇的細(xì)菌性疾病，并同時顧慮到養(yǎng)殖戶對疫苗使用的陌生，必導(dǎo)致疫苗推廣困難。因此、設(shè)計一推廣策略，亦即將在魚苗在交付養(yǎng)殖戶前，預(yù)先注射在養(yǎng)殖過程可能遭遇的多種細(xì)菌的疫苗。此預(yù)先已防疫的石斑魚苗(Pre-Immunized Special Pathogen Resistant, PI-SPR)魚苗，將具高抗病力，因而育成養(yǎng)殖期必有較高存活率。此PI-SPR魚苗也因此具養(yǎng)殖戶使用方便；產(chǎn)品可減少疾病、提高飼養(yǎng)存活率；降低成本、增加養(yǎng)殖利潤；魚苗具品牌形象，不易被模仿及競爭取代及可減少抗生素使用，維護(hù)養(yǎng)殖環(huán)境等優(yōu)點(diǎn)。
作者: 水寶寶 時間: 2012-1-14 09:56
四.系統(tǒng)整合
團(tuán)隊組合當(dāng)初、我們依循人類或陸地畜、禽產(chǎn)生技醫(yī)藥研發(fā)的模式，很單純地只往個別疫苗及單一技術(shù)進(jìn)行研發(fā)。但努力四年使用于實(shí)驗(yàn)室證明有效的口服疫苗，于現(xiàn)有坊間半室內(nèi)式育苗場卻一再失敗。依此經(jīng)驗(yàn)，我們發(fā)現(xiàn)在水生動物的疾病控制策略與陸地養(yǎng)殖生活于空氣中的動物決然不同。因此在研究及產(chǎn)品研發(fā)的觀念，研發(fā)方向及防疫策略皆由失敗經(jīng)驗(yàn)中學(xué)習(xí)，重新制訂。
以此新觀念、以近六年以生產(chǎn)bio-security的原則，整合環(huán)境、營養(yǎng)、防疫三個互動的情況，研發(fā)系列的解決方法、產(chǎn)品(關(guān)鍵零組件) ，并培育具新觀念的人才，再全盤整合，建立數(shù)據(jù)化的標(biāo)準(zhǔn)作業(yè)手冊(SOP)。再經(jīng)三年、進(jìn)入試量產(chǎn)之工作，進(jìn)行萬尾級的試量產(chǎn)，產(chǎn)品田間試用驗(yàn)證，證明此系統(tǒng)生產(chǎn)的PI-SPR魚確可協(xié)助養(yǎng)殖戶大量降低疾病、育成率高，提升經(jīng)營利潤；大量減少抗生素使用、生產(chǎn)無藥物殘留之魚貨供消費(fèi)者安心使用；也使水產(chǎn)養(yǎng)殖成為一對環(huán)境友善并可永續(xù)經(jīng)營的精致產(chǎn)業(yè)。
五、總結(jié)
由團(tuán)隊之組合，創(chuàng)新技術(shù)的研發(fā)，系列預(yù)防醫(yī)藥產(chǎn)品之開發(fā)，無病毒魚苗生產(chǎn)系統(tǒng)之構(gòu)筑及新的PI-SPR高抗病力魚苗產(chǎn)品之推廣策略，一連串由學(xué)至產(chǎn)的系列的努力成果及策略規(guī)劃，我們希望成果能快速技轉(zhuǎn)產(chǎn)業(yè)，大量生產(chǎn)PI-SPR的高抗病力石斑魚苗，供應(yīng)石斑養(yǎng)殖戶使用。供應(yīng)消費(fèi)者質(zhì)量佳、無化學(xué)物及抗生素殘留的有機(jī)石斑。協(xié)助臺灣傳統(tǒng)石斑養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)之轉(zhuǎn)型，科技化、精致化。構(gòu)建可永續(xù)經(jīng)營的綠色石斑養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)，也希望藉此持續(xù)保持臺灣在國際暖水魚種養(yǎng)殖科技之領(lǐng)導(dǎo)地位。
作者: 等風(fēng) 時間: 2012-1-15 15:30
支持！明天上午準(zhǔn)時關(guān)注！
作者: 水寶寶 時間: 2012-1-15 16:31
上次我們采訪楊老師的幾個問題，在此也與網(wǎng)友們一起分享下：
問：您是從什么時候開始做石斑魚疫苗的，這個疫苗針對的是什么病原，此病原的危害有多大？
楊.：我在疫苗研究是1995年由畜產(chǎn)疫苗開始,1999年才轉(zhuǎn)入水產(chǎn)疫苗。開始由育成期多種細(xì)菌性疾病開始，在2000年発現(xiàn)石斑魚苗(胚胎)期會罹犯旋轉(zhuǎn)病病毒(NNV) 非常特殊，在幼水魚苗如何使用疫苗對科學(xué)家也很具挑戰(zhàn)。
NNV(Nervous necrosis virus,腦神經(jīng)壞死病病毒)感染石斑、鱸魚、比目魚、海鱺等重要魚種自胚胎期之魚苗就會受感染， 不同石斑有不同病毒發(fā)病時期，病癥: 旋轉(zhuǎn)式游泳 ，病理:腦細(xì)胞及視網(wǎng)膜細(xì)胞之感染 ，在石斑魚苗期感染具近100%致死率，漸漸被認(rèn)為是為國際養(yǎng)殖高價魚種最棘手的病毒。
作者: 水寶寶 時間: 2012-1-15 16:33
問：目前主要應(yīng)用于石斑魚的那個成長階段，免疫的效果如何？
楊：我們目前有二類疫苗系列產(chǎn)品可預(yù)防由魚苗至育成期常見之大部份疾病,達(dá)到全面預(yù)防之目標(biāo)。(魚病多,若只針對一種疾病防疫也是徒勞無功。)
第一類系以魚苗期以NNV之口服疫苗為主效果可充份預(yù)防魚苗期病毒
第二類是注射性多價型疫苗,成果是達(dá)到一年存活率80-90%。結(jié)果皆已発表于國際學(xué)術(shù)期刊(可用google查閱”楊惠郎”或Huey Lang Yang)。并請參閱上述背景說明。
作者: 水寶寶 時間: 2012-1-15 16:34
問：該疫苗是否獲得商業(yè)上批準(zhǔn)，正式生產(chǎn)應(yīng)用在實(shí)際生產(chǎn)中？
楊： 應(yīng)是，但法規(guī)上準(zhǔn)許耗時，在申請執(zhí)照中以自家疫苗之方式使用,但不準(zhǔn)銷售。
問：在大陸，疫苗從研發(fā)到正式獲得批準(zhǔn)進(jìn)行商業(yè)生產(chǎn)并應(yīng)用于實(shí)際生產(chǎn)需要很長甚至幾十年的情況，臺灣的情況如何？
楊：相同
作者: 水寶寶 時間: 2012-1-15 16:34
問：您從事科研工作以及從事疫苗研發(fā)，對于您的工作有何感受？
楊：很幸運(yùn)地、各項(xiàng)研發(fā)成果逐漸獲得國、內(nèi)外學(xué)產(chǎn)界之肯定。在國內(nèi)曾獲得教育部產(chǎn)學(xué)合作獎、生策會國家新創(chuàng)獎(生物醫(yī)學(xué),2007)、工業(yè)局生技創(chuàng)新發(fā)明應(yīng)用競賽金牌獎(2008)及金、銅牌獎(2009)。在國際上、曾獲得惠普(HP: Hewlett Parker)年青學(xué)者發(fā)明獎，2009年歐洲水產(chǎn)學(xué)會最佳墻報獎及2009年”發(fā)展中國家科學(xué)院農(nóng)業(yè)科學(xué)獎 (TWAS Prize in Agricultural Sciences)。除學(xué)術(shù)上成果也可貢獻(xiàn)產(chǎn)業(yè)，造福人類。
我們已技轉(zhuǎn)產(chǎn)業(yè)，正大量生產(chǎn)PI-SPR的高抗病力石斑魚苗，希望快速推廣此研發(fā)成果，
l供應(yīng)石斑養(yǎng)殖戶使用，協(xié)助傳統(tǒng)石斑養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)之科技化、精致化，
l供應(yīng)消費(fèi)者質(zhì)量佳、無化學(xué)物及抗生素殘留的有機(jī)石斑，
l在環(huán)境維護(hù)上，構(gòu)建可永續(xù)經(jīng)營的綠色石斑養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)。
作者: 水寶寶 時間: 2012-1-15 16:35
問：您對疫苗防病的前景怎么看，至少在現(xiàn)在大陸疫苗還不是主要的防病手段？
楊：預(yù)防重于治療。觀察人類許多重大疾病防治成功的先例，觀察人類許多重大疾病防治成功的先例，往往都是先以疫苗預(yù)防疾病，輔以檢驗(yàn)試劑確定病原，再以對癥之醫(yī)藥(含抗生素)來治療疾病，這三大醫(yī)藥關(guān)鍵零組件之齊備，才能組合成為現(xiàn)代疾病防治之體系。在水產(chǎn)養(yǎng)殖之過程中，必需有適當(dāng)?shù)聂~用疫苗可用來生產(chǎn)高抗病力之魚苗，以事先預(yù)防未可預(yù)測及突發(fā)的疾病；不同之檢驗(yàn)試劑在病情初發(fā)期可快速確定病原及相關(guān)抗藥性，以對癥下藥并可檢測疫苗免疫之效用，抗病力之監(jiān)控及作為魚苗質(zhì)量之檢定；而醫(yī)藥可只使用于病原已確定、抗藥性已偵測過之細(xì)菌，作有效，正確的治療。此疾病防治系統(tǒng)已在人類使用多年、效果也證明良好。在畜產(chǎn)業(yè)上之使用也逐漸取代以抗生素預(yù)防疾病之劣習(xí)。魚產(chǎn)業(yè)中、挪威及歐美也沿用多年證明正確有效。但目前暖水魚種養(yǎng)殖上，疫苗及檢驗(yàn)試劑之一并研發(fā)極為迫切，也只有這二件關(guān)鍵零組件之建立，方能配合醫(yī)藥來組合暖水魚種的疾病防治之體系。
我們已經(jīng)知道疫苗早已是人類，畜產(chǎn)不可或缺的預(yù)防醫(yī)藥。豬，牛，羊，雞，鴨等畜禽產(chǎn)及寵物用疫苗也是疫苗產(chǎn)業(yè)之重點(diǎn)。但是暖水魚魚病相當(dāng)嚴(yán)重，卻尚無疫苗、檢驗(yàn)試劑之疾病管理系統(tǒng)。我們最近每每看到東南亞的水產(chǎn)品因含氯霉素在歐、美、日本退貨的消息，是否歐美日故意使用高檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)來排斥外貨？還是我們也應(yīng)開始思考養(yǎng)殖是否可以不用抗生素？都是先以疫苗預(yù)防疾病，輔以檢驗(yàn)試劑確定病原，再以對癥之醫(yī)藥(含抗生素)來治療疾病，這三大醫(yī)藥關(guān)鍵零組件之齊備，才能組合成為現(xiàn)代疾病防治之體系。在水產(chǎn)養(yǎng)殖之過程中，必需有適當(dāng)?shù)聂~用疫苗可用來生產(chǎn)高抗病力之魚苗，以事先預(yù)防未可預(yù)測及突發(fā)的疾病；不同之檢驗(yàn)試劑在病情初發(fā)期可快速確定病原及相關(guān)抗藥性，以對癥下藥并可檢測疫苗免疫之效用，抗病力之監(jiān)控及作為魚苗質(zhì)量之檢定；而醫(yī)藥可只使用于病原已確定、抗藥性已偵測過之細(xì)菌，作有效，正確的治療。此疾病防治系統(tǒng)已在人類使用多年、效果也證明良好。在畜產(chǎn)業(yè)上之使用也逐漸取代以抗生素預(yù)防疾病之劣習(xí)。魚產(chǎn)業(yè)中、挪威及歐美也沿用多年證明正確有效。但目前暖水魚種養(yǎng)殖上，疫苗及檢驗(yàn)試劑之一并研發(fā)極為迫切，也只有這二件關(guān)鍵零組件之建立，方能配合醫(yī)藥來組合暖水魚種的疾病防治之體系。
作者: 水中樂 時間: 2012-1-15 23:56
這次來了中國大陸之外的專家座談了。等候……
作者: 水寶寶 時間: 2012-1-16 08:36
各位童鞋早上好！是否已經(jīng)等待很久了呢？
今天我們在線交流將于9點(diǎn)半正式開始，時間只有2小時，邀請的嘉賓是臺灣國立成功大學(xué)楊惠郎教授，正如樓上所說，是第一位大陸之外的專家哦！！！
楊教授對石斑魚疫苗有多年的研究，感興趣的童鞋抓緊時間提問哦！
作者: 水寶寶 時間: 2012-1-16 08:40
由于楊老師比較習(xí)慣看繁體中文，所以，請所有提問的童鞋盡量用繁體中文哦！
如果你沒有也沒關(guān)系，小編我來幫你轉(zhuǎn)
作者: 水中樂 時間: 2012-1-16 09:22
各位童鞋早上好！是否已經(jīng)等待很久了呢？
今天我們在線交流將于9點(diǎn)半正式開始，時間只有2小時，邀請的嘉 ...
水寶寶 發(fā)表于 2012-1-16 08:36 
作者: xiaofei27 時間: 2012-1-16 09:23
本帖最后由 水寶寶 于 2012-1-16 09:29 編輯
難得有機(jī)會與楊老師交流，很榮幸能提幾個問題：
'.病毒具有很強(qiáng)的宿主特異性，這種特異性在不同魚種的差異大嗎？打個比方，nnv在石斑魚中是重要的病原，在對于其他魚種也會致病嗎？
;.在大陸，魚用疫苗得到了廣泛的認(rèn)可，但是使用並不廣泛，這種情況的原因是什麼呢？在臺灣是否也有這樣的情況？
.NNV在臺灣的流行情況如何？
謝謝您的答複。
作者: 水寶寶 時間: 2012-1-16 09:31
xiaofei27動作很快哦！感謝參與！
作者: 水寶寶 時間: 2012-1-16 09:34
楊老師，上線了先別著急回答問題，先和網(wǎng)友們打個招呼吧！
作者: 楊惠郎 時間: 2012-1-16 09:39
回復(fù) 36# xiaofei27
NNV的感染機(jī)制但也尚在努力中.
疫苗在臺灣目前尚未有官方通過獲得執(zhí)照的產(chǎn)品,並無實(shí)際使用,但需求存在,問題在行政單位核審嚴(yán),注射不方便,價格高,
作者: 楊惠郎 時間: 2012-1-16 09:41
各位好,謝謝參與,敬祝新年快樂
作者: lin9902057 時間: 2012-1-16 09:41
本帖最后由 水寶寶 于 2012-1-16 09:44 編輯
楊老師，您的口服疫苗免疫率有多少？
作者: fishdis 時間: 2012-1-16 09:42
本帖最后由 水寶寶 于 2012-1-16 09:44 編輯
請問楊老師，NNV疫苗是核酸疫苗？還是減毒或滅活疫苗？
作者: 楊惠郎 時間: 2012-1-16 09:44
NNV也感染鱸魚、比目魚、海鱺等重要魚種，更嚴(yán)重的是臺灣最普偏的青斑及龍膽石斑在胚胎期之魚苗就會受感染，在孵化後14至50天最常見疾病發(fā)生，在龍膽石斑50天後之稚魚至成魚階段則也見病毒感染。而稚魚期一旦感染常達(dá)100%致死率，被認(rèn)為是國際高價魚種養(yǎng)殖最嚴(yán)重的疾病之一。
作者: fishdis 時間: 2012-1-16 09:44
本帖最后由 水寶寶 于 2012-1-16 09:45 編輯
中國水産科學(xué)研究院珠江水産研究所自主研發(fā)的草魚出血病活疫苗（GCHV—;892株）獲得國家生産批準(zhǔn)文號（獸藥生字（獸藥生字（2011）190986021），），這是我國曆史上首個水産疫苗生産批文。
作者: 老兵新傳 時間: 2012-1-16 09:47
本帖最后由 水寶寶 于 2012-1-16 09:49 編輯
楊教授，請問您的疫苗是抗體疫苗（被動免疫）還是抗原疫苗（主動免疫）？免疫後到産生保護(hù)作用，大約需多長時間？
作者: 楊惠郎 時間: 2012-1-16 09:50
回復(fù) 41# lin9902057
在實(shí)驗(yàn)室攻毒試驗(yàn)達(dá)到"比較存活率RPS"
攻毒實(shí)驗(yàn) 免疫組(%) 控制組(%) 相對保護(hù)率(%)
A次 80 (20/25) 44 (11/25) 64.2
B次 86 (30/35) 54 (27/50) 69.5
育苗場現(xiàn)場使用因常有NNV侵入,而疫苗需七天才能発生效果所以效果不佳.我們也已有的解決方法請參考po上的"發(fā)展生物科技協(xié)助石斑育苗產(chǎn)業(yè)之科技化"文章
作者: 水寶寶 時間: 2012-1-16 09:51
各位網(wǎng)友提問好積極，小編也有一些疑問想請教楊老師：
2011年4 月，新聞報道臺灣成功大學(xué)與慕洋生技簽署優(yōu)質(zhì)石斑魚苗養(yǎng)殖系統(tǒng)技術(shù)轉(zhuǎn)移授權(quán)書，楊老師能否介紹一下“優(yōu)質(zhì)石斑魚苗養(yǎng)殖系統(tǒng)”？
作者: 楊惠郎 時間: 2012-1-16 09:52
回復(fù) 45# 老兵新傳
是被動免疫,目前臺灣也有passive immunity的iRNA, 及IgY的產(chǎn)品研發(fā)中
作者: 南海漁醫(yī) 時間: 2012-1-16 09:53
請問楊博士兩個問題：一 NNV垂直傳播，病毒粒子是在附著卵表面還是在坯胎內(nèi)部？有研究顯示用碘消毒可消滅病毒粒子，但臺灣島內(nèi)研究病毒粒子位于坯胎內(nèi)。如果是在卵膜表面，做好消毒就可以，但如果是坯胎內(nèi)部，破膜的幼體已經(jīng)帶有病毒，再投喂疫苗有無效果？
二 個人研究顯示大陸南方海南的石斑魚幼魚NNV帶毒率接近100%（PT-PCR），但帶毒不一定發(fā)病,就是半斤的石斑魚帶毒率也在97%以上，大概2年前左右，石斑魚30天內(nèi)苗黑身打轉(zhuǎn)癥狀極為明顯，而現(xiàn)在黑身多，但很少打轉(zhuǎn)，檢測也是NNV，是不是病毒出現(xiàn)變異？篩選抗NNV的石斑魚品系有無可能？
祝好！
作者: fishdis 時間: 2012-1-16 09:53
本帖最后由 水寶寶 于 2012-1-16 09:56 編輯
前面介紹了那麼多內(nèi)容，我看幾乎全部是做宣傳的，而很少涉及疫苗本身的。
作者: 楊惠郎 時間: 2012-1-16 09:56
回復(fù) 47# 水寶寶
就是已po上之SPR魚苗,方法是魚苗出貨前先注射免疫育成階段會預(yù)見的病原,二年來在田間現(xiàn)場成果提升育成存活率由原來之30%至80%
作者: xiaofei27 時間: 2012-1-16 09:57
本帖最后由 水寶寶 于 2012-1-16 09:59 編輯
回復(fù) 43# 楊惠郎
謝謝楊老師，如果這樣說的話，nnv的宿主範(fàn)圍還是很廣的，疫苗的應(yīng)用範(fàn)圍也更大。是不是可以這樣認(rèn)爲(wèi)：病毒在魚類中的種間特異性並不明顯？或者只是nnv的宿主範(fàn)圍比較廣？
作者: 水寶寶 時間: 2012-1-16 09:58
回復(fù) 50# fishdis
李老師您可以多問問您感興趣的問題落！
作者: 楊惠郎 時間: 2012-1-16 09:58
回復(fù) 42# fishdis
口服是滅毒疫苗,注射是次單元疾苗Subunit vaccine,
作者: blackcarp 時間: 2012-1-16 10:00
請問楊博士兩個問題：一 NNV垂直傳播，病毒粒子是在附著卵表面還是在坯胎內(nèi)部？有研究顯示用碘消毒可消滅病 ...
南海漁醫(yī) 發(fā)表于 2012-1-16 09:53
也想問這個
作者: 水寶寶 時間: 2012-1-16 10:01
回復(fù) 51# 楊惠郎
那可隔離外界病毒汙染的生産標(biāo)準(zhǔn)流程(SOP)能與大家分享一下嗎？
作者: 楊惠郎 時間: 2012-1-16 10:04
回復(fù) 50# fishdis
是的,在學(xué)校石斑魚苗產(chǎn)量小(每批大約五萬尾),二年來田間實(shí)作達(dá)80%存活率,,不足作大規(guī)模實(shí)驗(yàn)以累積實(shí)作成果,我們正要求技轉(zhuǎn)承接廠商努力生產(chǎn)SPR高抗病力魚苗以供田間實(shí)作
作者: 楊惠郎 時間: 2012-1-16 10:05
回復(fù) 56# 水寶寶
非常精確的問題, 現(xiàn)已技轉(zhuǎn)廠商,恐需他們同意
作者: fishdis 時間: 2012-1-16 10:06
本帖最后由 水寶寶 于 2012-1-16 10:09 編輯
謝謝楊老師！也就是說魚苗階段主要是采用滅活疫苗－最傳統(tǒng)的疫苗。注射用的亞單位疫苗適用于大規(guī)格魚。
作者: blackcarp 時間: 2012-1-16 10:07
楊教授您好！另外我想問下，目前蝦蟹上能否按您的苗種期免疫思路進(jìn)行防治一些苗種期和養(yǎng)殖過程中的病毒��？
這種多重包裹，保護(hù)抗原的思路很好，我想在集約化養(yǎng)殖時候是容易做到的，一旦進(jìn)入到養(yǎng)殖環(huán)節(jié)是否還能很好應(yīng)用？養(yǎng)殖時魚苗散放於池塘中，天然餌料為主時該如何預(yù)防？
作者: 楊惠郎 時間: 2012-1-16 10:08
回復(fù) 55# blackcarp
我們覺得應(yīng)大部份在卵外殼,因可用方法去除,若在卵內(nèi)恐用碘也不行了,也會影響孵化率
作者: 水寶寶 時間: 2012-1-16 10:11
前天幾網(wǎng)友問的問題：
漁用疫苗的使用，是預(yù)防魚病的最佳手段呀。石斑魚這兩年受病毒影響非常大，期待楊老師給我們指點(diǎn)迷津，請問國內(nèi)和誰聯(lián)系，可以買得到這類疫苗並得到技術(shù)指導(dǎo)，謝謝！
不知道這項(xiàng)技術(shù)是否能轉(zhuǎn)化到大陸來呢？
作者: blackcarp 時間: 2012-1-16 10:11
問題蠻多：關(guān)於口服疫苗的安全性，散失於水體中的，以及魚苗排泄出的疫苗成分，如一些毒力基因是否有可能被自然界的其他細(xì)菌或病毒所攝取並改造為自身的毒力成分？這些非病原可能成為其他養(yǎng)殖魚類的病原，目前有無安全對策。
作者: 浪漫小子 時間: 2012-1-16 10:11
哇，好熱鬧，暫時未想到有什么問題
作者: 楊惠郎 時間: 2012-1-16 10:12
回復(fù) 41# lin9902057
我們的育苗系統(tǒng)(使用SPF硬體及疫苗)已達(dá)到五年近五十次連續(xù)無病毒五萬尾pilot生產(chǎn),詳請見已po之文章
作者: 張永安 時間: 2012-1-16 10:14
本帖最后由 水寶寶 于 2012-1-16 10:15 編輯
請教楊老師兩個問題：
1、 滅活的NNV口服疫苗是如何制備的？是將滅活的NNV病毒直接添加在飼料中嗎？但是從您的文章中看到，您是將NNV的抗原表達(dá)在大腸桿菌中投餵豐年蝦然後作爲(wèi)?zhàn)D料來給石斑魚口服，這不應(yīng)該成爲(wèi)滅活疫苗吧！
2、請問注射用的NNV亞單位疫苗您是用的NNV的哪個蛋白所謂保護(hù)性抗原的？
謝謝！
作者: 南海漁醫(yī) 時間: 2012-1-16 10:16
本帖最后由 南海漁醫(yī) 于 2012-1-16 10:55 編輯
請問楊博士：臺灣石斑魚苗以池塘培育為主還是車間的水泥池為主？ 在大陸海南這兩種方式都有，但以池塘為主，直接放受精卵到池塘，如果這樣，楊博士您開發(fā)的這種疫苗可否應(yīng)用？是不是池塘需要投喂大量帶抗原的大腸桿菌？第二個問題 石斑魚NNV有沒有研究母體免疫的可能，讓受精卵和坯胎直接帶有抗體。
作者: 水寶寶 時間: 2012-1-16 10:16
回復(fù) 66# 張永安
哇，張老師來了，非常歡迎！
作者: 楊惠郎 時間: 2012-1-16 10:18
回復(fù) 63# blackcarp
是的,我們也了解此問題,首先這些基因在二天內(nèi)用rtPCR尚可檢測到,但以後就查測不出來,又也已不用抗藥性(antibiotic resisitant marker)作selection marker.所以已解決你關(guān)切的抗藥性殘留基因的困擾
作者: 老兵新傳 時間: 2012-1-16 10:18
本帖最后由 水寶寶 于 2012-1-16 10:22 編輯
聽說臺灣石斑魚虹彩病毒疫苗研發(fā)也取得很好進(jìn)展，楊教授能否順帶簡單介紹一下？
作者: 浪漫小子 時間: 2012-1-16 10:22
楊教授，您好
1、疫苗對田間作業(yè)成活率的有大幅的提升，這是值得肯定的。
2、在臺灣，工業(yè)化養(yǎng)殖石斑魚，一般業(yè)界認(rèn)為成活率是多少%，使用疫苗提升至多少%
作者: blackcarp 時間: 2012-1-16 10:22
虹彩病毒疫苗，國內(nèi)好像鱖魚上有做滴？記不清楚了
作者: 楊惠郎 時間: 2012-1-16 10:25
回復(fù) 67# 南海漁醫(yī)
臺灣石斑魚苗以池塘培育為主還是車間的水泥池為主？ 在大陸海南這兩種方式都有，但以池塘為主，直接放受精卵到池塘，如果這樣，楊博士您開發(fā)的這種疫苗可否應(yīng)用？
A: 已有病毒感染之育苗場,疫苗使用效果不佳,因疫苗需七天後才有免疫力.
第二個問題 石斑魚NNV有沒有研究母體免疫的可能，讓受精卵和坯胎直接帶有抗體。
A. 是的,可行,但病毒感染途徑多,母體垂直感染只是其一,我們的經(jīng)驗(yàn)是需全面防止來自各方的病毒,因此花了近八年発展全面防止無病毒之石斑育苗系統(tǒng),詳請參po文
作者: 水寶寶 時間: 2012-1-16 10:25
本帖最后由 水寶寶 于 2012-1-16 10:28 編輯
回復(fù) 72# blackcarp
曾令兵研究員做了娃娃魚虹彩病毒的疫苗
作者: 楊惠郎 時間: 2012-1-16 10:30
回復(fù) 71# 浪漫小子
在臺灣，工業(yè)化養(yǎng)殖石斑魚，一般業(yè)界認(rèn)為成活率是多少%，使用疫苗提升至多少%
A: 坊間之傳統(tǒng)育苗大約十次有一二次會成果,我們的系統(tǒng)是連續(xù)成功無病毒育苗近五十次,並已技轉(zhuǎn)給廠商以迅速量產(chǎn)供業(yè)界使用
作者: fishdis 時間: 2012-1-16 10:31
本帖最后由 fishdis 于 2012-1-16 10:33 編輯
回復(fù) 74# 水寶寶
是的，曾令兵研制的大鯢虹彩病毒疫苗也是滅活疫苗，在試用中，效果不錯。我國有批文的只有一個草魚呼腸孤病毒疫苗。
作者: 水寶寶 時間: 2012-1-16 10:32
楊老師，請問您研發(fā)的口服疫苗大約還需多久的時間能通過政府部分的審批呢？
作者: 楊惠郎 時間: 2012-1-16 10:33
回復(fù) 70# 老兵新傳
彩虹有三、四種.在魚苗階段沒NNV嚴(yán)重,大多発現(xiàn)於育成期我們也研発次單位疫苗
作者: 楊惠郎 時間: 2012-1-16 10:33
回復(fù) 77# 水寶寶
真的不曉得
作者: 水寶寶 時間: 2012-1-16 10:35
本帖最后由 水寶寶 于 2012-1-16 10:40 編輯
楊老師，接下來您在石斑魚疫苗上還會開展哪些方面的研究？
作者: 楊惠郎 時間: 2012-1-16 10:38
回復(fù) 66# 張永安
Q. 滅活的NNV口服疫苗是如何制備的？是將滅活的NNV病毒直接添加在飼料中嗎？但是從您的文章中看到，您是將NNV的抗原表達(dá)在大腸桿菌中投餵豐年蝦然後作爲(wèi)?zhàn)D料來給石斑魚口服，這不應(yīng)該成爲(wèi)滅活疫苗吧！
A. 我們係將抗原表達(dá)在大腸桿菌殺死後再包埋於餌料生物再餵魚,確實(shí)不是一般死菌疫苗而是已包埋之死菌疫苗d.包埋是deliver vaccine之劑型
2、請問注射用的NNV亞單位疫苗您是用的NNV的哪個蛋白所謂保護(hù)性抗原的？
Coat protein
作者: 水寶寶 時間: 2012-1-16 10:39
QQ網(wǎng)友問題：楊教授的疫苗生物包被技術(shù)是如何實(shí)現(xiàn)的？投餵過程疫苗的損失率是多少？有多少（比例）最終能進(jìn)入魚體腸道刺激黏膜免疫反應(yīng)？
作者: 張永安 時間: 2012-1-16 10:41
楊老師您好！
我想了解一下您研發(fā)NNV口服疫苗和注射用次單位疫苗的具體思路，也就是請您回複66樓的問題。
還有一個問題：請問您是用什麼來作selection marker的？
謝謝！
作者: 楊惠郎 時間: 2012-1-16 10:43
回復(fù) 47# 水寶寶
2011年4 月，新聞報道臺灣成功大學(xué)與慕洋生技簽署優(yōu)質(zhì)石斑魚苗養(yǎng)殖系統(tǒng)技術(shù)轉(zhuǎn)移授權(quán)書，楊老師能否介紹一下“優(yōu)質(zhì)石斑魚苗養(yǎng)殖系統(tǒng)”？
A;請參閱po文之精緻石斑養(yǎng)殖系統(tǒng)
作者: 楊惠郎 時間: 2012-1-16 10:44
回復(fù) 41# lin9902057
請參po文之精緻石斑養(yǎng)殖系統(tǒng)及其他答覆
作者: 老兵新傳 時間: 2012-1-16 10:44
本帖最后由 水寶寶 于 2012-1-16 10:47 編輯
鱖魚虹彩病毒中大和珠江所都在做，不知臺灣石斑魚虹彩病毒疫苗和鱖魚虹彩病毒疫苗能否通用？新加坡石斑魚虹彩病毒好像是蛙病毒屬，估計與臺灣石斑魚和鱖魚虹彩病毒差異較大。
作者: 楊惠郎 時間: 2012-1-16 10:48
回復(fù) 83# 張永安
我想了解一下您研發(fā)NNV口服疫苗和注射用次單位疫苗的具體思路，也就是請您回複66樓的問題。
A. 口服疫苗在NNV最猖獗的魚苗階段才能用,但保護(hù)期短,注射疫苗保護(hù)期長.可減少施用次數(shù)
還有一個問題：請問您是用什麼來作selection marker的？
A. 容我保留一點(diǎn)商業(yè)機(jī)密
作者: 楊惠郎 時間: 2012-1-16 10:51
回復(fù) 86# 老兵新傳
手頭並無學(xué)術(shù)資料你的資訊應(yīng)是正確.有一點(diǎn)自已的疑問，我們lab在臺灣也発現(xiàn)一些疑是彩虹的病魚用rtPCR查不出Irido而有NNV
作者: blackcarp 時間: 2012-1-16 10:51
還有一個問題：請問您是用什麼來作selection marker的？
A. 容我保留一點(diǎn)商業(yè)機(jī)密
作者: 水寶寶 時間: 2012-1-16 10:52
回復(fù) 86# 老兵新傳
我剛看到南海海洋所也有做石斑魚虹彩病毒滅活疫苗
作者: 張永安 時間: 2012-1-16 10:53
本帖最后由 水寶寶 于 2012-1-16 10:55 編輯
回復(fù) 87# 楊惠郎
謝謝楊老師的回複！
如果不涉及到商業(yè)機(jī)密的話，請問您用于制備NNV次單位疫苗的Coat protein具體是指哪一個蛋白？
作者: 細(xì)菌 時間: 2012-1-16 10:55
楊老師，你好。針對剛開口的魚苗進(jìn)行免疫接種，會不會造成免疫耐受的問題。
作者: 水寶寶 時間: 2012-1-16 11:00
各位童鞋，不好意思打擾一下，本次活動剩余的時間不多了，抓緊時間提問哦
作者: 楊惠郎 時間: 2012-1-16 11:01
回復(fù) 80# 水寶寶
接下來您在石斑魚疫苗上還會開展哪些方面的研究？
A> 去年已退休,
1. 學(xué)術(shù)上、在成功大學(xué)已建立年青團(tuán)隊傳承,
2. 在產(chǎn)業(yè)上已技轉(zhuǎn)慕洋生技公司量產(chǎn)SPR石斑魚苗,今年己建廠完成,現(xiàn)正開始生產(chǎn)三批,
3. 當(dāng)高抗病力魚苗能大量供應(yīng)後,也希輔導(dǎo)及協(xié)助養(yǎng)殖業(yè)者進(jìn)入無用藥藥及對環(huán)境友善之石斑養(yǎng)殖方式,建立可永續(xù)經(jīng)營之水產(chǎn)養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)
作者: 南海漁醫(yī) 時間: 2012-1-16 11:04
疫苗是個好東西，但在生產(chǎn)上大規(guī)模應(yīng)用還有相當(dāng)距離，當(dāng)務(wù)之急應(yīng)該是怎麼做到石斑魚帶毒而不發(fā)病。
作者: 楊惠郎 時間: 2012-1-16 11:06
回復(fù) 92# 細(xì)菌
好問題.尚未有學(xué)術(shù)上具數(shù)據(jù)之答案.在使用17 dph之石斑魚苗上取得很好的保護(hù)力之實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)下，我們的猜測在魚苗之 胚胎階段可能尚無tolerance 之機(jī)制?
作者: 楊惠郎 時間: 2012-1-16 11:07
回復(fù) 95# 南海漁醫(yī)
請參po文精緻石斑魚苗生產(chǎn)系統(tǒng)
作者: 水寶寶 時間: 2012-1-16 11:08
回復(fù) 94# 楊惠郎
您已退休？真是看不出來，覺得您心態(tài)非常年輕！
作者: 楊惠郎 時間: 2012-1-16 11:10
回復(fù) 91# 張永安
已発表二次在國際期刊,手頭無資料.若查不到煩請email給我,我可送電子檔給你
作者: 楊惠郎 時間: 2012-1-16 11:15
回復(fù) 95# 南海漁醫(yī)
更好的理想 是不帶病毒,也不會得病,更不會汙染養(yǎng)殖環(huán)境的養(yǎng)殖方法,社會需要永續(xù)經(jīng)營並對地球友善的生產(chǎn)方式
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